[发明专利]调控微生物生物被膜形成的基因靶点及其应用

权利要求书

1.一种Nuo2蛋白或其编码基因的抑制剂的用途，其特征在于，用于制备(i)用于抑制、瓦解或降解微生物生物被膜的制剂或制品；和/或(ii)抗菌药物。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的生物被膜包括念珠菌属(Candida species)菌株的生物被膜。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述制剂或所述抗菌药物用于选自下组的一种或多种用途：

(a)抑制念珠菌属菌株的生长；

(b)降低念珠菌属菌株的毒力；

(c)抑制念珠菌属菌株的ALS3、HWP1和ECE1基因的表达；

(d)抑制念珠菌属菌株生物被膜的形成；

(e)瓦解和/或降解念珠菌属菌株已经形成的生物被膜。

4.一种确定测试化合物是否是Nuo2蛋白的抑制剂或促进剂的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)在测试组中，在培养体系中，在甘露醇作为非发酵碳源条件下，在测试化合物的存在下，培养表达ALS3、HWP1、和/或ECE1基因的念珠菌属菌株一段时间T1，检测测试组所述培养体系中的ALS3、HWP1、和/或ECE1基因的表达量E1；

并且在不存在所述测试化合物且其他条件相同的对照组中，检测对照组所述培养体系中ALS3、HWP1、和/或ECE1基因的表达量E2；

(b)对E1和E2进行比较，如果E1显著低于E2，则表示所述测试化合物是Nuo2蛋白抑制剂；如果E1显著高于E2，则表示所述测试化合物是Nuo2蛋白促进剂。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤(c)：将步骤(a)中所确定的Nuo2蛋白抑制剂施用于念珠菌属菌株，测定其对念珠菌属菌株Nuo2蛋白活性的影响。

6.一种筛选抑制念珠菌属菌株生物被膜的候选化合物的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)将Nuo2蛋白与化合物库混合，测定化合物库中的化合物与所述Nuo2蛋白的结合情况；

其中，如果所述测试化合物库中的化合物与所述Nuo2蛋白有结合，则表明所述与Nuo2蛋白结合的化合物为候选化合物。

(b)将步骤(a)中所确定的候选化合物施用于念珠菌属菌株，测定其对念珠菌属菌株生物被膜的影响。

7.一种筛选抑制念珠菌属菌株生物被膜的候选化合物的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)在测试组中，在培养体系中，在测试化合物的存在下，培养念珠菌属菌株一段时间T1，检测测试组所述培养体系中所述线粒体复合物I的形成情况；

并且在不存在所述测试化合物且其他条件相同的对照组中，检测对照组所述培养体系中所述线粒体复合物I的形成情况；

(b)如果所述测试组中的所述线粒体复合物I的形成数量Q1显著低于所述对照组中的所述线粒体复合物I的形成数量Q2，则表示所述测试化合物是候选化合物。

8.一种体外非治疗性的抑制念珠菌属菌株生物被膜的方法，其特征在于，包括步骤：

在Nuo2蛋白或其编码基因的抑制剂存在的条件下，培养念珠菌属菌株，从而抑制所述念珠菌属菌株生物被膜的形成。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述Nuo2蛋白或其编码基因的抑制剂的作用浓度为0.01-50mg/L，较佳地，0.02-5mg/L。

10.一种抑制念珠菌属菌株生物被膜的药物组合物，其特征在于，包括：

(i)安全有效量的Nuo2蛋白或其编码基因的抑制剂；和

(ii)药学上可接受的载体。