[发明专利]一种双靶标融合蛋白及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种双靶标融合蛋白，所述双靶标融合蛋白包括三个结构功能区域，所述三个节构功能区域分别是A、B和C。所述A是指血小板生长因子β受体胞外域免疫球蛋白样区域D1-D3(PDGFRβD1-D3)；所述B是指血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)胞外免疫球蛋白样区域II和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)胞外免疫球蛋白样区域III(VEGFR1II-VEGFR2III)；所述C是指人免疫球蛋白恒定区片段(Fc)。

2.如权利要求1所述的双靶标融合蛋白，其特征在于，所述A、B、C的排列顺序是：A-B-C，B-A-C或A-C-B。

3.如权利要求1所述的双靶标融合蛋白，其特征在于，所述A的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述B的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述C的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。

4.如权利要求2所述的双靶标融合蛋白，其特征在于，所述双靶标融合蛋白的结构功能域之间还包括连接肽，所述连接肽的氨基酸序列可以是(GG1G)n或是(GS)n或是(GGGS)n。n＝0，1，2，---，5。

5.一种含有如权利2-4要求所述的表达载体。

6.一种重组的宿主细胞，所述宿主细胞含有如权利要求5所述的表达载体、或者所述宿主细胞染色体中整合有如权利要求2-4要求所述的多核苷酸。

7.如权利要求6所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞选自哺乳动物细胞CHO-S、CHO-K1、HEK-293、COS7、SP20、Sf9、PerC6。

8.如权利要求1-4任一权利要求所述的双靶标融合蛋白的制备方法，包括：

1)用基因合成法分别得到PDGFRβD1-D3、VEGFR1II-VEGFR2III和Fc的多核苷酸序列；分别将PDGFRβD1-D3、VEGFR1II-VEGFR2III和Fc片段通过搭桥PCR拼接融合，并克隆到质粒中；

2)将所获得的质粒转化到宿主细胞中进行表达，得到所需要的双靶标融合蛋白。

9.一种药物组合物，含有如权利要求1-4任一权利要求所述的双靶标融合蛋白及至少一种药学可接受的载体或赋形剂。

10.如权利要求1-4任一权利要求所述的双靶标融合蛋白在制备或筛选治疗血管增生性肿瘤、湿性老年性视网膜黄斑病变(AMD)的药物或制剂中的用途。