[发明专利]用于制备反式-4-羟基-L-脯氨酸的DNA分子和方法

权利要求书

1.DNA分子，其序列为序列表中序列1。

2.含有权利要求1所述DNA分子的生物材料，为下述B1)至B9)中的任一种：

B1)含有权利要求1所述DNA分子的表达盒；

B2)含有权利要求1所述DNA分子的重组载体；

B3)含有B1)所述表达盒的重组载体；

B4)含有权利要求1所述DNA分子的重组微生物；

B5)含有B1)所述表达盒的重组微生物；

B6)含有B2)所述重组载体的重组微生物；

B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；

B8)含有权利要求1所述DNA分子的重组细胞系；

B9)含有B1)所述表达盒的重组细胞系。

3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述重组载体为向pYB1s载体的多克隆位点插入权利要求1所述DNA分子得到的重组载体；所述pYB1s载体为将载体pACYCDuet-1的含有复制子和链霉素抗性基因的DNA片段与pBAD/His B载体的含有pBAD启动子、酶切位点和终止子的DNA片段进行拼接得到的载体；

所述重组微生物为将含有权利要求1所述DNA分子的重组载体导入大肠杆菌得到的重组微生物。

4.反式-4-羟基-L-脯氨酸的制备方法，包括：将权利要求2或3中任一所述重组微生物置入含有制备反式-4-羟基-L-脯氨酸的初始物质的体系中进行反应，得到反式-4-羟基-L-脯氨酸。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述制备反式-4-羟基-L-脯氨酸的初始物质为L-脯氨酸；

和/或，所述重组微生物在所述体系中的浓度为30OD/mL。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述体系由水和溶质组成；所述溶质及其浓度分别为100mM Tris、100mM L-脯氨酸、4mM FeSO₄和8mM维生素C，pH7.0；

和/或，所述反应在30℃下进行。

7.用于制备反式-4-羟基-L-脯氨酸的物质，由权利要求1所述DNA分子或权利要求2或3所述生物材料与用于制备反式-4-羟基-L-脯氨酸所需要的其他试剂组成。

8.根据权利要求7所述的物质，其特征在于：所述用于制备反式-4-羟基-L-脯氨酸所需要的其他试剂为权利要求4或5中所述制备反式-4-羟基-L-脯氨酸的初始物质。

9.下述任一应用：

M1、权利要求1所述DNA分子在制备反式-4-羟基-L-脯氨酸中的应用；

M2、权利要求1所述DNA分子在制备用于生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的产品中的应用；

M3、权利要求2或3所述生物材料在制备反式-4-羟基-L-脯氨酸中的应用；

M4、权利要求2或3所述生物材料在制备用于生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的产品中的应用；

M5、权利要求7或8所述物质在制备反式-4-羟基-L-脯氨酸中的应用。