[发明专利]一种酶解法制备黑豆ACE抑制肽

说明书

技术领域

本发明属于杂粮深加工领域，具体涉及的是酶解法制备黑豆ACE抑制肽。

背景技术

随着社会的发展，人们的生活水平得到提高，饮食结构改变，高血压以及高血压性心脏损害患病率增加。目前，对于高血压疾病的治疗多采用合成药物，这些合成药物需要长时间使用，存在明显的副作用，还会使机体产生明显的药物依赖性；另外，在现代生活中，各种激素所致的免疫力降低是目前人类普遍处于免疫力低下的“亚健康”状态，因此，如何预防和治疗高血压，提高机体免疫调节能力已成为全社会共同关注的焦点。存在于天然动植物资源的降血压功能因子，具有安全有效，无毒副作用等特点，在国内外受到广泛关注。其中，降压肽已成为了当今高血压防治研究中的一个热点。

黑豆中含有丰富的蛋白质、淀粉、矿物质、维生素以及人体必需氨基酸。黑豆可以补血养肾、降低胆固醇、清热解毒、美容养颜、改善肠胃；能软化血管、滋润皮肤延缓衰老，特别是对高血压、心脏病、肝脏、动脉硬化等老年性疾病大有益处。目前，对于黑豆的加工，大多数厂家都侧重于黑豆淀粉的生产加工，而忽略了蛋白质的存在，把它作为生产废料或牲畜饲料，造成黑豆资源的浪费，增加了黑豆淀粉的生产成本。

肽是蛋白质的酶解产物，肽在原蛋白序列中没有生物活性，在食品加工过程或胃肠消化过程中这部分肽被释放出来后显示出一定的生物活性。有关研究表明，蛋白质经可控酶解作用可制备出具有促进钙吸收、降血压、降胆固醇、抗氧化等作用的功能肽，而且食物源蛋白质制备得到的肽具有天然安全的特点。因此对于生物活性肽的开发是当前国际食品界最热门的研究课题和极具发展前景的项目。

发明内容

一种酶解法制备黑豆ACE抑制肽，这种酶解法制备黑豆ACE抑制肽的具体工艺如下：

(1)将黑豆蛋白粉溶解于小分子活化水中，配置成质量百分比浓度为10％～40％的蛋白质溶液；将蛋白溶液置于90℃恒温水浴锅中预热10～15min后再冷却至40～50℃；

(2)黑豆蛋白的酶解：将冷却的黑豆蛋白溶液用1mol/L的NaOH调节，使pH值在8.0～9.0；加入酶用量与底物蛋白质量之比为2％～3％的碱性蛋白酶，，于50-55℃的水浴下水解2～4h，反应过程中不断加入1mol/L的NaOH，使溶液pH值维持恒定，待水解结束后调节pH值到7.0，100℃左右灭活10分钟，移出上清液；

(3)将步骤(2)制备的黑豆肽采用截留分子量分别为1kDa和3kDa的超滤膜进行处理， 将截留后的1kDa～3kDa的滤过液经冷冻干燥即得黑豆ACE抑制肽粉末产品；

实施方式

实施例1

(1)黑豆蛋白粉溶解于小分子活化水，配置成25％的蛋白溶液，将蛋白溶液至于90℃恒温水浴锅中预热10min，将预热后的黑豆蛋白溶液冷却至50℃。

(2)黑豆蛋白的酶解：将冷却后的黑豆蛋白溶液用1mol/L的NaOH调节，使pH值为9.0。加入酶用量与底物蛋白质量之比为2％的碱性蛋白酶(酶活力为200000U)，于55℃下的水浴中水解3h，反应过程中不断加入1mol/L的NaOH，使溶液pH值维持恒定，待水解结束后调节pH值到7.0，100℃左右灭活10分钟，移出上清液。

(3)黑豆降压肽的制备：将步骤(2)制备的黑豆肽采用截留分子量分别为1kDa和3kDa的超滤膜进行处理，将截留后的1kDa～3kDa的过滤液经冷冻干燥即得黑豆ACE抑制肽粉末产品。

实施例2

(1)黑豆蛋白粉溶解于小分子活化水，配置成25％的蛋白溶液，将蛋白溶液至于90℃恒温水浴锅中预热10min，将预热后的黑豆蛋白溶液冷却至50℃。

(2)黑豆蛋白的酶解：将冷却后的黑豆蛋白溶液用1mol/L的NaOH调节，使pH值为9.0。加入酶用量与底物蛋白质量之比为2.5％的碱性蛋白酶(酶活力为200000U)，于55℃下的水浴中水解4h，反应过程中不断加入1mol/L的NaOH，使溶液pH值维持恒定，待水解结束后调节pH值到7.0，100℃左右灭活10分钟，移出上清液。

(3)黑豆降压肽的制备：将步骤(2)制备的黑豆肽采用截留分子量分别为1kDa和3kDa的超滤膜进行处理，将截留后的1kDa～3kDa的过滤液经冷冻干燥即得黑豆ACE抑制肽粉末产品。