[发明专利]一种环五肽的合成方法

说明书

本发明公开一种环五肽的合成方法。该方法采用“固液结合”策略及用合适的缩合试剂进行缩合反应，通过适当的工艺分别制备线性五肽，且关环位点选在N‑甲基亮氨酸与亮氨酸之间，有效提高制备线性肽时的效率。用合适的缩合试剂进行缩合反应，能有效地减少在形成酰胺键时的消旋化，从而有效提高了目标产物的纯度，纯度可达99％以上，能够充分满足生物活性试验和临床应用的需要，具有较高的医学价值。采用环合试剂PyBOP进行关环反应，可有效提高环合收率，其环合收率达84.2％。该方法不需进行繁杂的柱层析纯化，经由简单的洗涤即可将多余的氨基酸洗去，合成工艺简单，原料成本低，反应条件温和，纯度高，易于产业化，具有广阔的市场前景。

技术领域

本发明属于有机化学合成领域，具体涉及一种环五肽的合成方法。

背景技术

海洋环肽是海洋生物活性肽类中数量最庞大的一类化合物，其种类达到万种以上，被广大生物学家药学家还有化学家所关注，其部分环肽已进入临床。天然存在的环肽类化合物大多具有独特的结构(Tripathi A,Puddick J,Prinsep M R.J Nat Prod,2010,73(11),1810-1814；Tan K C,Wakimoto T,Takada K..J Nat Prod,2013,76(7),1388-1391.)，其生物利用率及生物活性均优于线性肽(Zheng L H,Wang Y J,Sheng J.MarDrugs,2011,9(10),1840-1859.)虽然环肽类化合物广泛存在于动、植物，低等海洋生物，微生物和细菌中，但自然界存在的环肽含量非常少，对于分离带来的很大的困难，故合成环肽化合物已经成为最热的研究课题之一(Wang D X，Han X，Gong X.Chinese Journal ofOrganic Chemistry.2008,28(4),549-573)。

从自然界动植物或者微生物中分离出来的环肽有一部分含有N-甲基酰胺键，含N-甲基酰胺键的环肽生物活性要比不含N-甲基酰胺键环肽的活性高出十几倍至几万倍(Chatterjee,J.Rechenmacher,F.and Kessler.H.Angew.Chem.Int.Ed.2013,52,254–269.)。

环五肽Galaxamide是本课题组从中国南海西沙群岛永兴岛采集的红藻乳状丝节藻(Galaxaura filamentosa)中分离得到的一种新型环五肽，其化学结构中含有两个N-甲基酰胺键。对Galaxamide进行体外抗肿瘤活性实验，试验数据表明该化合物对多种肿瘤细胞具有一定的细胞毒性，同时对该化合物诱导肝癌细胞Bel-7402凋亡机制进行了初步研究，结果显示Galaxamide有望成为新型抗癌药物的先导化合物，但是天然来源分离得到的具有较好活性的天然产物极其少量，不能满足人们需要。本课题组采用经典的“3+2”策略对其进行了液相合成。因液相法在每次反应后都需要进行柱层析纯化，在整个反应中需要5次柱层析纯化，需要耗费大量溶剂和时间，并且该方法的环合产率不高，仅有50％左右(XuW.J.，Liao X.J.，Xu S.H.，Organic Letters，2008，10(20),4569-4572.)。

发明内容

为了克服现有技术中合成环五肽Galaxamide上存在的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种环五肽Galaxamide的合成方法。本发明通过采用“固液结合”策略不需要进行柱层析纯化，能够有效地缩短合成线性肽的时间，合适的环合试剂使用，使得环合收率达84.2％。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种环五肽的合成方法，通过“固液结合”策略合成环五肽，具体包括以下步骤：

(1)将芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)进行N-甲基化反应，得到芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸(Fmoc-N-Me-Leu-OH)；