[发明专利]一种环五肽的合成方法

权利要求书

1.一种环五肽的合成方法，其特征在于具体包括以下步骤：

(1)将芴甲氧羰酰基亮氨酸进行N-甲基化反应，得到芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸；

(2)将芴甲氧羰酰基亮氨酸连接到2-氯三苯甲基氯树脂，得到保护氨基酸和树脂的复合物Fmoc-Leu-Resin(R-1A)；

(3)将步骤(2)得到的Fmoc-Leu-Resin(R-1A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与芴甲氧羰酰基亮氨酸在缩合试剂存在的条件下与其进行缩合反应，得到保护二肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)；

(4)将步骤(3)得到的Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与步骤(1)得到的芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸在缩合试剂存在下进行缩合反应得到保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)；

(5)将步骤(4)得到的保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与芴甲氧羰酰基亮氨酸在缩合试剂存在的条件下与其进行缩合反应得到保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)；

(6)将步骤(5)得到的保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与步骤(1)得到的芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸在缩合试剂存在下进行缩合反应得到保护五肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-5A)，对其进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后进行切肽反应，得到线性五肽后对线性五肽进行关环反应，得到环五肽；

所述的环五肽，其化学名称为：环(亮氨酰-亮氨酰-N-甲基-亮氨酰-亮氨酰-N-甲基-亮氨酰)；英文缩写表达式为：cyclo-(Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu)；分子式为C₃₂H₅₉N₅O₅；结构式如下所示：

步骤(3)、(4)、(5)、(6)中所述的缩合试剂为1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑和1,3-二异丙基碳二亚胺；

所述的1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑和1,3-二异丙基碳二亚胺的摩尔比为1：1；

步骤(6)中所述的关环反应是指用PyBOP作为环合试剂，线性五肽首尾环合得到环五肽，其具体操作步骤为：将线性五肽溶于二氯甲烷中，氮气保护下，再向其中加入环合试剂PyBOP，DIEA调节pH至7～8，室温下搅拌反应，反应24～48小时，减压蒸除溶剂，用反相HPLC分离得到目标产物。

2.根据权利要求1所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(1)中所述的将芴甲氧羰酰基亮氨酸进行N-甲基化反应的具体操作步骤为：取Fmoc-Leu-OH悬浮于甲苯中，加入多聚甲醛和催化量的对甲苯磺酸，将混合物共沸回流30～50分钟，除去水；用饱和NaHCO₃水溶液洗涤并用无水Na₂SO₄干燥；过滤，减压旋去溶剂后进行硅胶柱层析得到化合物(1)；将化合物(1)溶于二氯甲烷，加入无水三氯化铝和三乙基硅烷，待反应结束后，反应液用1mol/L的盐酸洗涤两遍；洗涤液用无水Na₂SO₄干燥，真空浓缩得到粗产品后进行硅胶柱层析得到芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸。

3.根据权利要求2所述的环五肽的合成方法，其特征在于：

所述的多聚甲醛是Fmoc-Leu-OH的1～2摩尔倍量；

所述的无水三氯化铝是Fmoc-Leu-OH的1.5～3摩尔倍量；

所述的三乙基硅烷是Fmoc-Leu-OH的1.5～3摩尔倍量。