[发明专利]Slit2D2-嵌合抗原受体及其应用

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体由能够结合抗原的胞外结构域、跨膜结构域和胞内免疫共刺激分子组成，其中，所述胞外结构域为Slit2蛋白的D2结构域，所述Slit2蛋白的D2结构域的氨基酸序列如SEQ ID No：1所示。

2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于：所述跨膜结构域包括CD28、CD3ε、CD45、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD134、CD137、ICOS、CD154跨膜结构域中的一种或多种；

和/或，所述胞内免疫共刺激分子包括CD3ζ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD5、CD22、CD79a、CD79b、CD66d、CD2、CD4、CD5、CD28、CD134、CD137、ICOS、CD154、4-1BB和OX40胞内结构域中的一种或多种。

3.如权利要求2所述的嵌合抗原受体，其特征在于：所述嵌合抗原受体由Slit2蛋白的D2结构域、CD8跨膜结构域、4-1BB胞内结构域和CD3ζ胞内结构域组成，记为Slit2D2-CD8™-4-1BB-CD3ζ，所述的Slit2D2-CD8™-4-1BB-CD3ζ具有：

9）如SEQ ID No：5所示的氨基酸序列。

4.一种编码嵌合抗原受体的基因，所述嵌合抗原受体由能够结合抗原的胞外结构域、跨膜结构域和胞内免疫共刺激分子组成，其中，所述胞外结构域为Slit2蛋白的D2结构域，所述Slit2蛋白的D2结构域基因序列如SEQ ID No：6所示。

5.如权利要求4所述的编码嵌合抗原受体的基因，其特征在于：所述的嵌合抗原受体由Slit2蛋白的D2结构域、CD8跨膜结构域、4-1BB胞内结构域和CD3ζ胞内结构域组成，记为Slit2D2-CD8™-4-1BB-CD3ζ，其中，所述Slit2D2-CD8™-4-1BB-CD3ζ的基因序列如SEQ IDNO：10所示。

6.包含如权利要求4或5所述编码嵌合抗原受体的基因的重组载体、表达盒、重组细胞、重组菌或重组病毒。

7.一种嵌合抗原受体表达细胞，所述嵌合抗原受体表达细胞为在细胞中引入了如权利要求4或5所述的编码嵌合抗原受体的基因；所述细胞为T细胞或含有T细胞的细胞群。

8.一种制备嵌合抗原受体表达细胞的方法，包括将权利要求4或5所述的编码嵌合抗原受体的基因引入细胞中的步骤，其中，所述将编码嵌合抗原受体的基因引入细胞中的步骤包括：

合成和扩增如权利要求4或5所述的编码嵌合抗原受体的基因，将所述基因克隆至表达载体上；

利用包装质粒和表达载体转染细胞；

使细胞表达嵌合抗原受体，其中，在细胞表面表达Slit2D2分子；

所述细胞为T细胞或含有T细胞的细胞群。

9.一种药物组合物，其特征在于：包括如权利要求1-3任一项所述的嵌合抗原受体或者如权利要求7所述的嵌合抗原受体表达细胞，以及药学上可接受的辅料。

10.如权利要求1-3任一项所述的嵌合抗原受体或者如权利要求7所述的嵌合抗原受体表达细胞在制备治疗Robo1高表达肿瘤药物中的应用。