[发明专利]一种α-地中海贫血基因检测试剂盒

说明书

本发明提供一种可同时检测6种缺失型α‑地中海贫血基因(‑α^3_.7、‑α^4_.2、‑‑^SEA、‑‑^THAI、‑‑^FIL和‑α^27_.6)和6种非缺失型α‑地中海贫血基因(α^CSα、α^QSα、α^WSα、α¹³α、α^43‐44α和α⁴⁹α)的试剂盒，包括DNA芯片、PCR反应液I和PCR反应液II，所述DNA芯片包括基底和固定于所述基底上的探针。本发明的有益效果在于：采用PCR‑反向点杂交的检测原理，根据各基因型的突变或缺失位点，设计相应的扩增引物和探针，将探针固定在DNA芯片上，通过特异性引物扩增出来的PCR产物，与固定在DNA芯片上的探针进行杂交、信号显色盒判读来进行地贫的诊断。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种在临床样本中一次实验诊断12种α-地中海贫血基因(包括6种缺失型α-地中海贫血基因和6种非缺失型α-地中海贫血基因)的试剂盒。

背景技术

地中海贫血(简称“地贫”)是由于珠蛋白基因发生缺陷，致使珠蛋白链合成减少或不能合成，使形成血红蛋白的珠蛋白链比例失衡，而导致的一种可遗传的溶血性血液病。主要包括两种类型：α-地贫和β-地贫。但α-地贫的人群携带率远高于β-地贫。

α-地贫(包括缺失型α-地贫和非缺失型α-地贫)是世界上最常见的单基因遗传病之一，中国南方的广西、广东、云南、海南、香港等省市及其周边地区是本病的高发地区。α珠蛋白基因位于16号染色体上，每条16号染色体有2个α珠蛋白基因(简称“α-基因”)。α-地贫是由于α-基因发生突变导致肽链失衡而造成的。若是染色体上的1个α-基因发生了缺失或缺陷，α链的合成只受到了部分抑制，则称为α⁺地贫；若是染色体上2个α-基因都发生了缺失或缺陷称为α⁰地贫。只有1个α-基因发生异常，即α⁺地贫杂合状态时，一般没有明显的临床症状，表现型为静止型；当2个α-基因发生异常，即α⁺地贫纯合子或者α⁰杂合子状态时，仍有相当数量的α-链合成，症状轻微，表现型为标准型；当3个α-基因发生异常，即α⁰和α⁺地贫的杂合子状态时，患者仅能合成少量的α-链，症状为中度溶血性贫血，表现型为血红蛋白H病(HbH病)；当4个α-基因发生异常，即α⁰地贫纯合子状态，无法生成α-链。正常情况下胎儿的血红蛋白主要成分为Hb F，由于缺乏α-链。多余的γ-链聚合形成四聚体，即Hb Bart’s。HbBart’s具有很高的氧亲和性，无法解决胎儿宫内供养的生理机能，继而引发胎儿水肿症，导致胎儿在宫内受累或分娩后半小时内死亡的妊娠结局。

中国常见的缺失型α-地贫基因型主要为-α^3_.7、-α^4_.2和--^SEA，这三种缺失型在个体中的不同组合，可表现为静止型、标准型、血红蛋白H病和Hb Bart’s胎儿水肿综合症这四种表现型。随着α-地贫机制的进一步阐明，一些新的基因缺失型相继被发现，如--^THAI(泰国型α-地贫)、--^FIL(菲律宾型α-地贫)、-α^27_.6等。