[发明专利]一种α-地中海贫血基因检测试剂盒

权利要求书

1.一种α-地中海贫血基因检测试剂盒，其特征在于：包括DNA芯片、PCR反应液I和PCR反应液II，所述DNA芯片包括基底和固定于所述基底上的探针，所述探针包括：

非缺失型α-地中海贫血基因所对应的正常对照探针，其碱基序列如SEQ ID NO：1-6；

用于检测非缺失型α-地中海贫血基因的探针，其碱基序列如SEQ ID NO：8-13；

用于检测缺失型α-地中海贫血基因的探针，其碱基序列如SEQ ID NO：15-20；

内参探针，其碱基序列如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：14；

所述PCR反应液I包括：

扩增缺失型α-地中海贫血基因的引物，其碱基序列如下：

引物3.7F，SEQ ID NO：23；

引物3.7R，SEQ ID NO：24；

引物4.2F，SEQ ID NO：25；

引物4.2R，SEQ ID NO：26；

引物SEAF，SEQ ID NO：27；

引物SEAR，SEQ ID NO：28；

引物THAIF，SEQ ID NO：29；

引物THAIR，SEQ ID NO：30；

引物FILF，SEQ ID NO：31；

引物FILR，SEQ ID NO：32；

引物27.6F，SEQ ID NO：33；

引物27.6R，SEQ ID NO：34；

内参引物，其碱基序列如下：

引物IC1F，SEQ ID NO：35；

引物IC1R，SEQ ID NO：36；

所述PCR反应液II包括：

扩增非缺失型α-地中海贫血基因的引物，其碱基序列如下：

引物ATF，SEQ ID NO：21；

引物ATR，SEQ ID NO：22；

内参引物，其碱基序列如下：

引物IC2F，SEQ ID NO：37；

引物IC2R，SEQ ID NO：38。

2.根据权利要求1所述的α-地中海贫血基因检测试剂盒，其特征在于，所述基底为尼龙膜。

3.根据权利要求1所述的α-地中海贫血基因检测试剂盒，其特征在于，所述引物5’端标记生物素。

4.根据权利要求1所述的α-地中海贫血基因检测试剂盒，其特征在于：每23体积份PCR反应液I中含有：

水：15.14体积份；

10×PCR buffer for KOD-Plus：2.5体积份；

25mM MgSO₄：0.5体积份；

2.5mM dNTP：2体积份；

100μM引物3.7F：0.1体积份；

100μM引物3.7R：0.1体积份；

100μM引物4.2F：0.95体积份；

100μM引物4.2R：0.95体积份；

100μM引物SEAF：0.05体积份；

100μM引物SEAR：0.05体积份；

100μM引物THAIF：0.05体积份；

100μM引物THAIR：0.05体积份；

100μM引物IC1F：0.03体积份；

100μM引物IC1R：0.03体积份；

1U/μL KOD-Plus酶：0.5体积份；

每23体积份PCR反应液II中含有：

水：18.51体积份；

10×PCR buffer for KOD-Plus：2.5体积份；

25mM MgSO₄：0.5体积份；

2.5mM dNTP：0.2体积份；

100mM dUTP：0.05体积份；

100μM引物ATF：0.06体积份；

100μM引物ATR：0.06体积份；

100μM引物FILF：0.05体积份；

100μM引物FILR：0.05体积份；

100μM引物27.6F：0.08体积份；

100μM引物27.6R：0.08体积份；

100μM引物IC2F：0.03体积份；

100μM引物IC2R：0.03体积份；

1U/μL UNG：0.3体积份；

1U/μL KOD-Plus酶：0.5体积份。