[发明专利]利用副产物二氧化碳自控pH的全细胞催化生产戊二胺的方法

权利要求书

1.全细胞催化生产1,5-戊二胺的方法，其特征在于，利用催化副产物CO₂自调节全细胞催化液的pH且采用非曝气的方法控制全细胞催化生产1,5-戊二胺。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述催化副产物CO₂全部来自于赖氨酸在赖氨酸脱羧酶的催化作用下产生1,5-戊二胺的过程中生成的CO₂。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述全细胞催化液的pH通过自调节维持在5.5-8.5之间；优选为7.0-8.0之间。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述非曝气的方法是指在全细胞催化的过程中不向催化液通入任何气体。

5.发酵罐/生物反应器中全细胞催化生产1,5-戊二胺的方法，其特征在于，利用发酵罐/生物反应器中的催化副产物CO₂自调节全细胞催化液的pH且采用非曝气的方法控制全细胞催化生产1,5-戊二胺；

所述发酵罐/生物反应器中全细胞催化液的温度控制在30-45℃，发酵罐/生物反应器搅拌转速设定为0-1000rpm。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述全细胞催化液是指包含戊二胺工程菌的菌体细胞、赖氨酸、磷酸吡哆醛和1,5-戊二胺的混合物。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述全细胞催化液中菌体细胞干重为0.5-30.0g/L，所述赖氨酸的添加量为0.3-5.0mol/L，所述磷酸吡哆醛的添加量为0.01-0.50mmol/L。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述戊二胺工程菌是指过表达赖氨酸脱羧酶基因的细菌；所述细菌优选为大肠杆菌，更优选为大肠杆菌B株或其衍生菌株。

9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述赖氨酸脱羧酶用来催化的底物为含有赖氨酸生产菌的赖氨酸发酵液、去除菌体的赖氨酸发酵液、去除菌体并脱色的赖氨酸发酵液、赖氨酸发酵液的离子交换洗脱液、游离赖氨酸、赖氨酸盐干粉或其溶液。

10.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述戊二胺工程菌通过如下方法培养：将戊二胺工程菌在LB液体培养基中培养，得到种子液；将 所述种子液接入含有丰富培养基或合成培养基的发酵罐中培养，培养一段时间后加入诱导剂诱导表达；将培养结束后的培养液或收集培养液中的菌体细胞用于1,5-戊二胺全细胞催化。