[发明专利]一种抗乳腺癌肿瘤转移的纳米抗体研制

权利要求书

1.一种能与TNFα特异性结合的抗体，其特征在于来源于骆驼，只具有重链可变区。

2.权利要求1的抗体基因在质粒载体上的克隆，其特征在于：质粒载体为pPICZα，酶切位点为XhoI、XbaI。

3.一种权利要求2所述的重组质粒的构建方法，其特征在于：PCR法扩增出Anti-TNFα-VHH基因，将扩增出的基因片段和质粒载体pPICZαA同时用XhoI、XbaI内切酶于37℃双酶切，琼脂糖凝胶电泳后切胶回收目的产物，16℃连接。

4.根据权利要求2所述的重组质粒，其特征在于：重组质粒转化到感受态毕赤酵母GS115中以表达融合蛋白。

5.根据权利要求4所述，一种构建的工程酵母菌表达的融合蛋白，其特征在于：融合蛋白用镍亲和层析柱纯化后，达电泳纯。

6.权利要求1所述抗体在体外抑制乳腺癌细胞系转移活性实验中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述细胞系为MCF-7、MDA-MB-231。

8.权利要求1所述抗体在治疗4T-1荷瘤小鼠中的应用。

9.如权利要求1所述抗体的用途，为用于制备治疗与TNFa相关的肿瘤治疗药物。

10.如权利要求9所述抗体的用途，其特征在于，所述治疗与TNFa相关的肿瘤药物为治疗乳腺癌转移药物。