[发明专利]一种生物法制备N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H-吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺的方法

权利要求书

1.一种生物法制备N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H-吡喃-2-基)-乙 基)-2-苯乙酰胺的方法，其特征在于，以N-(3-丙酮基)-2-苯乙酰胺为底物，使 其在助溶剂、2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶的存在下，在15℃～25℃下、pH为5～9 的缓冲溶液中，加入乙醛进行缩醛反应，生成所述的N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟 基四氢-2H-吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺，其中，起始反应体系中，底物的浓 度控制在5～20g/L间，所述的助溶剂为二甲基亚砜、吐温-60、聚乙二醇、聚乙 二醇辛基苯基醚中的一种或多种的组合，且所述助溶剂的投料体积为反应体系 总体积的5～15％，所述的2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶与底物的投料质量比为 0.5～2:1，

所述的N-(3-丙酮基)-2-苯乙酰胺的结构式为：

所述的N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H-吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰 胺的结构式为：

2.根据权利要求1所述的生物法制备N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H- 吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺的方法，其特征在于，所述的2-脱氧核糖-5-磷 酸醛缩酶为购自苏州汉酶生物技术有限公司的牌号为EW0694的2-脱氧核糖-5- 磷酸醛缩酶。

3.根据权利要求1所述的生物法制备N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢 -2H-吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺的方法，其特征在于，所述的助溶剂为二甲 基亚砜时，其投料体积为反应体系总体积的10～12％。

4.根据权利要求1所述的生物法制备N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H- 吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺的方法，其特征在于，所述的缓冲溶液为磷酸盐 缓冲溶液。

5.根据权利要求1所述的生物法制备N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H- 吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺的方法，其特征在于，起始反应体系中，所述底 物的浓度控制在10～20g/L间。

6.根据权利要求1至5任一项权利要求所述的生物法制备 N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H-吡喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺的方法，其 特征在于，具体实施过程如下：将所述的底物、助溶剂、2-脱氧核糖-5-磷酸醛 缩酶加入到所述的缓冲溶液中，在15℃～25℃下搅拌，然后恒速加入乙醛进行缩 醛反应，HPLC监测反应进程，反应完全后，加入乙酸乙酯进行萃取多次，合并 有机相、浓缩、柱层析分离得到所述的N-(2-((2R,4R)-4,6-二羟基四氢-2H-吡 喃-2-基)-乙基)-2-苯乙酰胺。