[发明专利]一种糖基功能化咪唑型离子液体固定相的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及高效液相色谱固定相的技术领域，特别涉及一种糖基功能化咪唑型离子液体固定相的制备方法。

背景技术

目前大部分离子液体-功能化高效液相色谱固定相是基于咪唑类或吡啶阳离子，本发明通过葡萄糖基离子液体的合成受到启发，通过简单的糖基化键合反应，将糖基和咪唑型离子液体有机结合，产生基于糖基的新咪唑离子液体硅胶固定相，获得的糖基咪唑功能化固定相被用于HILIC模式下分析物的评价。有文献报道类似的葡萄糖基离子液键合体固定相，例如：葡萄糖基季胺型表面固载离子液体硅胶固定相、葡糖铵离子液体固定相，前者合成步骤复杂，工艺难度大；后者可分离分化合物很少，分离范围窄。本发明的这种新的糖基功能化离子液体除可以分离上述两种固定相提到的分析物，还对核苷、黄酮类化合物和人体多肽有很好的分离效果。

发明内容

综上所述，为了克服现有技术问题的不足，本发明提供了一种糖基功能化咪唑型离子液体固定相的制备方法，解决了功能化咪唑类离子液体高效液相色谱固定相在溶剂、缓冲液等条件下稳定性受限且目标分析物单一的问题，实现对同类生物分子化合物的高效率分离分析。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种糖基功能化咪唑型离子液体固定相的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

步骤一：色谱用多孔球形硅胶经盐酸酸化处理后，水洗至中性，真空干燥后得到表面活化的硅胶，溶于甲醇，得到甲醇匀浆，备用；

步骤二：相等摩尔的D-葡萄糖酸内酯和N-(3-氨基丙基)咪唑溶解在乙醇里，加热回流，进行环氧开环反应，得到N-咪唑丙基葡糖酰胺；

步骤三：将相等摩尔的N-咪唑丙基葡糖酰胺和3-异氰酸酯基丙基三甲氧基硅烷混合溶于乙醇，继续回流，进行甲基化反应，得到N-三甲基硅基丙基-N’-葡糖酰胺丙基咪唑+离子；

步骤四：将步骤三中所得N-三甲基硅基丙基-N’-葡糖酰胺丙基咪唑+离子溶液进行机械搅拌，搅拌过程中添加步骤一中制备的硅胶的甲醇匀浆，所得悬浮液回流加热反应，得到的产物即为N，N’-三甲氧基丙基葡糖酰胺咪唑离子液体键合硅胶色谱固定相的乳白色悬浊液；

步骤五：将步骤四中所得的乳白色悬浊液过滤，真空干燥，避光保存，所得产物即为N，N’-三甲氧基丙基葡糖酰胺咪唑离子液体键合硅胶色谱固定相。

具体地，所述步骤一中，硅胶的酸化条件为用浓盐酸加热回流4～6h，用水洗至中性，在真空120℃，干燥6～8h，得到表面活化的硅胶，溶于甲醇，得到甲醇匀浆，备用。

具体地，所述步骤二中，将40～60mM的D-葡萄糖酸内酯和同等摩尔的N-(3-氨基丙基)咪唑同时溶解在200～300ml的乙醇里，加热至70～90℃，回流20～30h，得到N-咪唑丙基葡糖酰胺。

具体地，所述步骤三中，将5mM～8mM的N-咪唑丙基葡糖酰胺和同等摩尔的3-异氰酸酯基丙基三甲氧基硅烷混合溶于乙醇，回流2～4天，进行甲基化反应，得到N-三甲基硅基丙基-N’-葡糖酰胺丙基咪唑+离子。

具体地，所述步骤四中，将步骤三中得到的N-三甲基硅基丙基-N’-葡糖酰胺丙基咪唑+离子溶液加入磁子进行机械搅拌，并加入步骤一中制备的含有2.5～3.5g硅胶的甲醇匀浆15～25ml，搅拌均匀后，搅拌10～15h后，加热至65～75℃，回流24h，得到乳白色悬浊液。

具体地，所述步骤五中，将步骤四所得乳白色悬浊液过滤，并用体积比均为1：1的乙醇：水溶液和甲醇：水溶液进行清洗，过滤后所得的产物即为N，N’-三甲氧基丙基葡糖酰胺咪唑离子液体键合硅胶色谱固定相。将所得的产物放入真空干燥箱，在温度为70～100℃的情况下干燥8～12h，并且在进行表征之前存储在琥珀色的小瓶中。

N，N’-三甲氧基丙基葡糖酰胺咪唑离子液体键合硅胶色谱固定相，中文惯称为糖基功能化咪唑型离子液体固定相，英文简称为Sil-GLy-Imdzl，以下简称为糖基功能化咪唑型离子液体固定相或者Sil-GLy-Imdzl。

本发明采用的技术方案带来的有益效果是：