[发明专利]一种苹果中甲基硫菌灵残留量的检测方法

权利要求书

1.一种苹果中甲基硫菌灵残留量的检测方法，其特征在于，步骤如下：

1)标准储备液的配制，用十万分之一天平准确称取甲基硫菌灵标准品10mg于烧杯中， 精确至0.1mg，加乙腈溶解并定容至10mL容量瓶中，配制成浓度为1000μg/mL的单标储备液， 在冰箱中1℃～4℃保存；

2)标准工作溶液的配制，准确移取1mL单标储备液置于100mL棕色容量瓶中，用乙腈定 容至刻度，配成10μg/mL的标准中间液，根据需要移取适量标准中间液，用乙腈-水溶液稀释 成2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准工作溶液，各种标准溶液密 封保存于1℃～4℃冰箱中；

3)试样制备，取1000g带皮苹果样品经四分法选取一定量的样本，经粉碎或组织捣碎机 匀浆，获得待测样品，装入样品袋中，密封、标记、1℃～4℃冰箱中冷藏待用；

4)样品提取，取待测样品，加入5～8倍量的乙醚，涡旋振荡2～3min后再超声提取8～ 10min，加入2～4g氯化钠，再次涡旋4～5min，5500～6000r/min离心10～12min；再分2次加 入8～10倍量乙醚，涡旋振荡6～7min后5500～6000r/min离心12～15min，合并有机相，并采 用平行蒸发仪进行第一次浓缩，获得一次浓缩液；

5)样品洗脱，将活性炭小柱先用洗脱液进行活化，然后将一次浓缩液倒入活性炭小柱 后用洗脱液洗脱，获得洗脱收集液，所述洗脱液为乙酸乙酯和丙酮的等体积混合液，用量为 一次浓缩液体积的10～12倍；

6)二次浓缩及过滤，将洗脱收集液采用氮气吹促进洗脱液挥发的方式进行第二次浓 缩，获得二次浓缩液，二次浓缩液采用甲醇定容至2ml后，采用0.30μm滤膜过滤，获得滤液， 滤液供液质联用仪测定；

7)色谱测定；

8)质谱测定；

9)仪器测定，样品进样的程序为：试剂空白、标准工作曲线、样品空白、样品添加与实际 样品，重复以上步骤；

10)定量方法，按步骤9)进样，用色谱工作站建立标准工作曲线，样品采用工作曲线定 量。

2.根据权利要求1所述的苹果中甲基硫菌灵残留量的检测方法，其特征在于，步骤2) 中，乙腈-水溶液含0.15％甲酸，乙腈-水溶液中乙腈与水的体积比为1:1。

3.根据权利要求1或2所述的苹果中甲基硫菌灵残留量的检测方法，其特征在于，步骤 8)中，甲基硫菌灵的定量离子对为343、113/151、074，定性离子对为343、131/118、123，S- lens电压为76V，碰撞电压为18；51，扫描模式为positive，保留时间为7.6min，离子源为电 喷雾离子源，扫描方式为正负切换扫描，检测方式为多反应监测，毛细管温度为350℃，蒸发 温度为300℃，电喷雾电压为+3500(-3000)V，鞘气为30arb，辅助气为10arb，碰撞气为氩气。

4.根据权利要求3所述的苹果中甲基硫菌灵残留量的检测方法，其特征在于，步骤7) 中，色谱柱为HypersilGOLDC18，膜厚为1.9μm，内径为2.1mm×50mm，柱温为35℃，进样量为2 μL，采用梯度洗脱。

5.根据权利要求4所述的苹果中甲基硫菌灵残留量的检测方法，其特征在于，步骤7)中 梯度洗脱条件如下：

时间(min) 流速(ml/min) 乙腈(％) 含0.15％甲酸的水(％) 1 -->0.00 0.2 10.0 90.0 2.00 0.2 10.0 90.0 11.00 0.2 95.0 5.0 14.00 0.2 95.0 5.0 14.10 0.2 10.0 90.0 18.00 0.2 10.0 90.0