[发明专利]模式生物藻测定农药水分散粒剂毒性的方法

说明书

本发明公开了一种模式生物藻测定农药水分散粒剂毒性的方法，包括以下步骤：将农药水分散粒剂配制成梯度浓度的试验药液；将生物藻原液用无菌水稀配制成藻稀释液；将试验药液与藻稀释液混合，密封条件下培养72h，每隔24h对藻细胞计数，并记录藻细胞的生物效应和试验液的理化参数；根据藻细胞的生物效应参数计算农药水分散颗粒剂对藻细胞的半数效应浓度EC₅₀，判断农药水分散颗粒剂的毒性。本发明的方法具有易操作、实用性强、周期短，评价终点容易判断等优势。

技术领域

本发明涉及养殖技术领域，尤其涉及一种模式生物藻测定农药水分散粒剂毒性的方法。

背景技术

藻类是一种用于生态系统中重要的初级生长者研究的重要模式生物。作为水生生态系统初级生产者的藻类，占据着重要的位置，其种类的多样性和数量会直接影响水生态系统的结构功能，很多研究都利用一些敏感藻种作为指示生物，且这些藻种对毒物敏感、易获得、个体小、繁殖快，在较短时间内可得到化学物质对藻类许多世代及种群水平的影响评价，是一种良好的试验生物。广泛应用于生命科学、毒理学、环境科学和农业科学等领域。藻常被用于新化学物质登记中的藻类生长抑制毒性试验研究和农药登记藻类生长抑制毒性试验研究。

目前，采用藻类进行农药水分散粒剂毒性筛选的研究报道较少，即使有部分报道和相关的研究性模型，但是缺乏相关的研究数据评估该模型的适宜性和可靠性，尚未成为成熟和被认可的毒性筛选模型。因此，提供一种易操作、实用性强的藻类筛选农药水分散粒剂毒性的方法尤其重要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种易操作、实用性强的模式生物藻测定农药水分散粒剂毒性的方法。

为解决上述技术问题，提供了一种模式生物藻测定农药水分散粒剂毒性的方法，包括以下步骤：

S1、将农药水分散粒剂配制成梯度浓度的试验药液；

S2、将生物藻原液用无菌水稀配制成藻稀释液；

S3、将所述试验药液与所述藻稀释液混合，密封条件下培养72h，每隔24h对藻细胞计数，并记录藻细胞的生物效应和试验液的理化参数；

S4、根据藻细胞的生物效应参数计算农药水分散颗粒剂对藻细胞的半数效应浓度EC₅₀，判断农药水分散颗粒剂的毒性。

上述的方法，优选的，所述S1步骤具体为：将农药水分散颗粒剂与培养基稀释液混合，配制成梯度浓度的试验药液；所述培养基稀释液为将BG11培养基稀释10倍后的溶液。

上述的方法，优选的，所述步骤S2中所述生物藻原液为处于对数生长期的纯种藻。

上述的方法，优选的，所述步骤S3中所述，试验药液与所述藻稀释液的体积比为1∶1，所述藻稀释液中藻细胞的浓度为1.0×10⁴～1.0×10⁵个/mL。

上述的方法，优选的，所述步骤S3中所述培养的条件为：温度为21℃～24℃、光照强度为4440Lux～8880Lux、光照比为16h/8h。

上述的方法，优选的，培养期间，每隔24h将所述试验药液与所述藻稀释液的混合液摇动5次以上。

上述的方法，优选的，所述步骤S3中所述藻细胞的生物效应包括藻细胞的抑制率和藻细胞的中毒情况；所述藻细胞的中毒情况包括：藻细胞畸形、藻液变白、藻细胞体积变小、藻细胞粘连或聚结。

上述的方法，优选的，所述步骤S3中所述试验液的理化参数包括：试验液的水温、pH值和光照强度。