[发明专利]用于果蔬中敌草快拉曼增强光谱法及其试剂配方

说明书

技术领域

本发明是关于一种农药类残留物的快速检测技术，尤其涉及水果和蔬菜中敌草快现场快速检测的拉曼光谱法、试剂配方及使用方法。

背景技术

食品安全是一项关于国计民生的“民心工程”，直接关系到广大人民群众的身体健康和生命安全。而且，食品安全事件波及面广，尤其在农业生产中施用农药后，一部分农药直接或间接残留于谷物、蔬菜、果品、畜产品、水产品以及土壤和水体中，对人类健康安全乃至生活环境构成越来越严重的威胁。因此，能够安全、快速、有效的检测出瓜果蔬菜等农产品的农药残留技术成为科研工作者共同关注的问题。

敌草快，纯品为无色至淡黄色结晶，又名利农，一般用于传导性触杀灭生性除草剂，可迅速被绿色植物组织吸收，与土壤接触后很快失去活性，用于大田、果园、非耕地、收割前等除草，也可以用作马铃薯和地瓜的茎叶催枯。毒理学资料表明敌草快属中等毒类除草剂，其二溴化物对人的致死量约为6～12g，敌草快在胃肠道受细菌作用而降解，故其经胃肠道吸收少，吸收后随血流分布至全身器官、组织，其中以肝、肾浓度较高。其代谢产物的毒性较其原形低，肠道微生物对代谢起主要作用。主要通过肾脏排泄，亦有相当量通过胆汁排泄。因此，使用过敌草快的瓜果蔬菜中含有的农药残留会对人身体造成严重损害。目前常用检测敌草快的方法有气相色谱法、液相色谱法、毛细管电泳法、方波伏安法及这些方法与质谱的联用技术等。气相色谱/质谱法和液相色谱/质谱法是我们国家推荐的标准方法，而常规色谱法都需要繁琐耗时的样品前处理过程，且分析时间长。

表面增强拉曼散射(SERS)通常发生在粗糙的金、银等贵金属表面。SERS的电磁场增强机理认为，当入射激光照射到贵金属表面时，表面等离子体会被激发而导致局域电场的增强，最终引起拉曼散射的极大增强。因此，当分子吸附或非常接近具有SERS活性的基底表面时，分子的拉曼信号会被极大地增强。SERS检测技术由于具有灵敏度高、检测速度快、检测限极低及能够实现无损分析等优点已发展成为一种被广泛应用于表面科学、分析科学以及生命科学等领域的有力工具。

本文提出了一种利用SERS技术检测敌草快含量的方法，该方法操作过程简单，检测速度快，最低检测限可以达到10^－8mol/L，有望发展成为一种应用于敌草快及其它类似农药残留检测的常用方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种水果和蔬菜中残留敌草快的快速检测方法，采用提取技术和表面增强拉曼散射对水果和蔬菜中残留敌草快进行快速检测，成本低廉，可现场应用。

为适应上述需求，本发明提供简单的水果和蔬菜(如草莓、白菜等)前处理方法，提供检测试剂配方及其制备方法，提供敌草快现场快速检测的定性和定量分析方法。其步骤如下：

1.提取：用去离子水作为试样提取试剂，将蔬菜或水果打碎成浆汁状，准确称取试样3.0g，加入3mL去离子水旋窝混匀，于离心机中在8000～10000rpm下离心5～10min，吸取离心后的上层清液，用0.22μm滤膜过滤，取滤液待测。

2.检测：将滤液加入至预先加好一定量试剂A和B的检测池中，涡旋或摇振均匀，置于便携式拉曼快检仪检测室中进行拉曼光谱扫描，采集拉曼光谱图，拉曼谱图中如在1593cm^-1(波数误差<10cm^-1)处有特征峰，则判断样品添加了敌草快，反之则判定样品没有添加敌草快。本发明的拉曼增强光谱法，所述水均为二次蒸馏水或去离子水。

3.试剂：A为银胶体水溶液，按照公知的方法制备即可；试剂B为可使A凝聚的含Cl^-的电介质，Cl^-浓度范围为0.1M～1M；pH为3-14。所述试剂的用量如下：(1)试剂A：100-300μL；(2)试剂B：100-300μL；(3)试样滤液：100-500μL。

4.仪器：本发明所述便携式拉曼快检仪的激光光源发射波长为785nm。目前，中国检验检疫科学研究院、中检国研(北京)科技有限公司、必达泰克公司可提供满足测试要求的便携式拉曼光谱仪。

利用本发明时，后期的数据采集及结果分析步骤如下：