[发明专利]一种同时测定滴眼液中多种抑菌剂的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及滴眼液中抑菌剂的测定方法，具体涉及一种同时测定滴眼液中多种抑菌剂的检测方法。

背景技术

滴眼液系指眼用制剂中的滴眼剂，是一种将药物成分与药用添加剂均匀混入基质，制备成溶液、悬浊液、乳浊液的液体无菌制剂。滴眼液直接作用于眼部，通过局部黏膜吸收，大多发挥局部治疗作用。

滴眼液中药物可以直接接触药物作用部位，并且利用眼部黏膜吸收速度快的优势，快速完成药物吸收、分布，具有十分显著的速效作用与定向作用，在眼科疾病检查与治疗领域有不可替代的作用。按照中国药品现行法定最低标准《中国药典》2015年版规定，滴眼液属于液体无菌制剂，必须保持清洁和无菌的状态，以避免主成分分解、眼部二次感染等危害。按照现行《中国药典》规定，滴眼液制备处方中可以添加一定量的抑菌剂，以保持无菌状态。

目前，各类滴眼液中，添加抑菌剂的种类与剂量存在显著差异，这对药品成分筛查、制备工艺、科学研究、监督检验等工作造成一定困难。对于滴眼液中抑菌剂的种类与剂量的测定，现有的方法仅能对某一特定抑菌剂进行测定，或对某一特定类的几种抑菌剂进行测定，无法同时完成多种类、大数量的抑菌剂定性与定量检测。随着我国药品质量控制要求的日渐提高，需要一种更为快捷、方便、准确、全面的滴眼液中抑菌剂测定方法，以满足实际情况的需要。

发明内容

针对现有技术在完成滴眼液中抑菌剂的定性与定量检测中存在的频繁更换色谱系统、分析速度缓慢、多次重复分析、单次分析覆盖面窄的问题，本发明提供了一种同时测定滴眼液中多种抑菌剂的检测方法，本发明提供的检测方法仅需一次实验即可完成滴眼液中6类共计11种抑菌剂的种类鉴定及其含量测定，而不必更换色谱系统进行多次分析，具备操作简单、分析速度快、定量分析准确的特点，且本发明可以适用于几乎全部剂型，如溶液、悬浊液、乳浊液型滴眼液中的抑菌剂检查，适用范围广。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案，具体包括以下步骤：

步骤一、制备对照品溶液

分别精密称定氯己定、苯甲醇、三氯叔丁醇、山梨酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、硫柳汞、苯扎氯铵和苯扎溴铵对照品，加甲醇使溶解，于容量瓶中加50％甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，分别制成浓度分别约为10、240、500、500、100、15、40、20、30和20μg·mL^-1的对照品溶液；

步骤二、对待测滴眼液进行预处理

取待测滴眼液，将其过滤即为供试品溶液；

步骤三、通过高效液相色谱法测定对照品溶液

分别精密量取步骤一所述对照品溶液0.4，0.8，1，2，4，10，20mL，分别置于100mL量瓶中，用50％甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，制成7个系列浓度的对照品溶液，按以下色谱方法进样分析：

色谱柱：Waters XBridge C18(4.6mm×150mm，5μm)；检测波长为214nm；流动相A为0.1％磷酸溶液，流动相B为甲醇，流动相C为四氢呋喃；线性梯度洗脱条件为：0-3min，50％A、43％B、7％C，3-8min，50-5％A、43-88％B、7％C，8-10min，5％A、88％B、7％C，10-11min，5-50％A、88-43％B、7％C，11-16min，50％A、43％B、7％C；流速：1.0mL·min^-1；

分别取对照品溶液5μL进样分析，记录不同色谱峰的保留时间与峰面积，以不同色谱峰的保留时间用于待测滴眼液中抑菌剂的定性分析，并以对照品溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线并拟合回归方程，用于待测滴眼液中抑菌剂的定量分析；

对照品溶液加50％甲醇逐步稀释，进样分析，取仪器信噪比为3：1时溶液的浓度为各成分的检测限；

步骤四、鉴别、测定经过预处理后的滴眼液中抑菌剂的种类及含量

将步骤二中所述经过预处理的待测滴眼液按步骤三中所述液相色谱方法进行分析，记录保留时间与色谱峰面积，通过保留时间比对，鉴别滴眼液中抑菌剂的品种，将记录所得色谱峰面积套用回归方程计算，得到滴眼液中抑菌剂的含量。

本发明的技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：

本发明采用的液相色谱分析方法定性、定量效果准确，同时检测的抑菌剂种类多、品种多，检测速度快，本发明可以适用于不同厂家生产的不同品牌的滴眼液，适用范围广，效果稳定可靠。

附图说明