[发明专利]一种硫酸胍基丁胺的生物转化方法

权利要求书

1.一种硫酸胍基丁胺的生物转化方法，其特征在于，所述方法包括：以左旋精氨酸作为底物，以精氨酸脱羧酶作为生物转化催化剂，以磷酸吡哆醛作为辅酶，进行脱羧反应，生成胍基丁胺粗产物，将所述胍基丁胺粗产物用稀硫酸酸化，得到硫酸胍基丁胺粗产物，

所述精氨酸脱羧酶为经过固定化处理后的精氨酸脱羧酶，所述精氨酸脱羧酶的固定化处理包括如下步骤：

1)破碎含所述精氨酸脱羧酶的工程菌细胞，将所述工程菌细胞离心后，收集精氨酸脱羧酶液；

2)将步骤1)所收集的所述精氨酸脱羧酶液、添加剂和固定化载体按质量比为1︰0.6-0.8︰10-13加入pH值为6-8的缓冲溶液中，在25-35℃下恒温搅拌2-3h，离心后收集固体，得到固定酶载体；其中，所述添加剂包括硫酸铁和硫酸镁，所述硫酸铁和所述硫酸镁的质量比为1︰2；所述固定化载体为由藻土、石英砂、氧化铝和明胶组成，藻土、石英砂、氧化铝和明胶的质量比为4︰1︰1︰3；

3)将步骤2)中得到的所述固定酶载体用乙醇洗涤1-3次，干燥，即得到所述固定化处理后的精氨酸脱羧酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述精氨酸脱羧酶与所述左旋精氨酸的质量比不超过0.05；所述磷酸吡哆醛与所述左旋精氨酸的质量比不超过0.002。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述精氨酸脱羧酶与所述左旋精氨酸的质量比为1︰40；所述磷酸吡哆醛与所述左旋精氨酸的质量比为1︰1000。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脱羧反应的反应温度为19-46℃；所述脱羧反应的反应体系的pH值为6-10。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，当脱羧反应进行到1h以后，向所述脱羧反应补加左旋精氨酸。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，当脱羧反应进行到第2h时，向所述脱羧反应补加左旋精氨酸，补加的左旋精氨酸的质量为初始所加的左旋精氨酸的质量的一半。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括对所述硫酸胍基丁胺粗产物进行纯化，所述纯化步骤如下：

1)向所述硫酸胍基丁胺粗产物中加入活性炭，在40℃～60℃下放置1h～2h，再用孔径为0.45um的过滤膜抽滤，将抽滤后所得的溶液蒸发去除杂质，得到硫酸胍基丁胺粗晶体；

2)将步骤1)所得的所述硫酸胍基丁胺粗晶体用乙醇洗涤，过滤并干燥后，得到纯化的硫酸胍基丁胺晶体；

或者所述纯化步骤如下：

1)将乙腈、四氢呋喃、甲醇按体积比为2.5～3.5︰3.5～5︰1混合均匀，得到混合溶剂；

2)将所述硫酸胍基丁胺粗产物溶于步骤1)中的所述混合溶剂中，其中，所述硫酸胍基丁胺粗产物与所述混合溶剂的质量比为1︰8～13，抽滤，得到硫酸胍基丁胺粗晶体；

3)将步骤2)所得的所述硫酸胍基丁胺粗晶体用乙醇洗涤，过滤并干燥后，得到纯化的硫酸胍基丁胺晶体。