[发明专利]一种酶修复等温循环放大荧光法检测沙门氏菌的方法

权利要求书

1.一种酶修复等温循环放大荧光法检测水中或食品中沙门氏菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）拱形探针的构建；

（2）将目标菌与拱形探针加入HAP、Signal probe、Bst DNA 聚合酶、UDG和核酸内切酶IV，37℃，孵育2 h；

（3）荧光仪检测；

所述HAP的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；

所述Signal probe的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，具体的操作步骤如下：

（1）将灭菌水，10×的buffer缓冲液、20 μM 的Aptamer 1 μL和20 μM的Trigger 1 μL加入EP管中，在95℃下孵育5min，缓慢冷却至室温；

（2）在37℃下，向EP管中加入目标菌，向EP管中加入10μM HAP 1 μL、10 μM Signalprobe 1μL、1μL Bst DNA 聚合酶、1μL UDG和1μL核酸内切酶IV，37℃，孵育2 h；

（3）将上述反应后的溶液10 μL稀释至70 μL，荧光仪激发波长设置为486nm，用荧光仪在518nm处检测荧光；

所述Aptamer的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述Trigger的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。