[发明专利]一种利用水稻内生泛菌和小球藻共培养提高小球藻油脂产率的方法

说明书

本发明公开了一种利用水稻内生泛菌和小球藻共培养提高小球藻油脂产率的方法，包括：1)将水稻内生泛菌和小球藻在光照下进行菌藻共培养，培养结束后，得到菌藻共培养液；2)对菌藻共培养液进行细胞分离，得到小球藻细胞沉淀和内含水稻内生泛菌的上清菌液，将小球藻细胞沉淀经处理后得到小球藻细胞干品；3)将小球藻细胞干品粉碎，得到藻粉，之后采用有机溶剂提取液提取总油脂，得到总油脂。本发明利用水稻内生泛菌和小球藻共培养，从而促进小球藻的生长，提高了小球藻生物量，同时也提高了油脂含量与油脂产率。本发明方法操作简单，在小球藻的应用开发方面效益显著，前景广阔。

技术领域

本发明涉及微生物和生物技术领域，具体涉及一种利用水稻内生泛菌和小球藻共培养提高小球藻油脂产率的方法。

背景技术

小球藻是一种单细胞绿藻，其环境适应性强，易于大规模培养，细胞中含有丰富的营养物质，可应用于食品开发、医疗保健品、美容和药品开发等各个领域。小球藻富含短链脂肪酸，是优质的生物柴油原料(徐进,等.高产油小球藻的筛选及其油脂分析.水生生物学报,2012,36(3):426-432.)，而且小球藻所产油脂中的亚油酸和γ-亚麻酸等具有调节血脂、降血黏等功效[张旗，等.小球藻营养活性研究进展.食品研究与开发,2015,36(13):139-142.]。提高小球藻生物量和促进藻细胞营养物质的合成是开发应用小球藻的技术关键。已有研究表明微藻和微生物之间存在从寄生到共生等广泛的互作现象，某些微生物对藻细胞的生长代谢影响显著(Ueda H,et al..Bacterial communities constructed inartificial consortia of bacteria and Chlorella vulgaris.Microbes Environment,2010,25(1):36-40.)。

植物内生菌是能够定殖在健康植物内，并与宿主植物建立和谐共生关系的一类微生物。水稻植株含有许多内生微生物，是重要的内生细菌资源，来源于水稻植株的内生泛菌可以显著提高宿主水稻的生物量、叶绿素及磷含量，并影响光合作用产物的转移(FengY,etal.Rice endophyte Pantoea agglomeransYS19 promotes hostplant growth andaffects allocations of hostphotosynthates.Journal ofApplied Microbiology,2006,100(5):938-945.刘佳,等.内生成团泛菌HAUM1对宿主水稻的定殖及促生作用.湖北农业科学,2011,50(23):4820-4824.)。由于小球藻与植物细胞一样具有叶绿体，能够进行光合作用，其生化代谢特征与植物具有相似性，理论上，对植物具有代谢调节作用的植物内生菌也能影响小球藻的生长和代谢活动，但迄今国内外未见采用包括水稻内生菌在内的植物内生菌促进小球藻生长及生化组分合成积累的技术研究和应用。

申请公布号CN 103045481 A(申请号为201310004747.X)的中国发明专利申请公开了一种促进小球藻生长并提高其叶绿素和菌体蛋白含量的方法，该技术方案是在小球藻培养液中添加来自生物质热解的内醚糖或经脱毒处理的纤维素热解液，内醚糖添加量为5mM-50mM，纤维素热解液添加量按重量计为0.25％-2％。以纤维素生物质高温热解产物内醚糖或热解液作为促进剂，结果表明：内醚糖或热解液能明显促进小球藻的生长，促进率最高达194％，并可显著提高叶绿素和菌体蛋白含量，从而可提高纤维素生物质的利用价值。

发明内容

本发明提供了一种利用水稻内生泛菌和小球藻共培养提高小球藻油脂产率的方法，该方法能够提高小球藻生物量、油脂含量与油脂产率。

一种利用水稻内生泛菌和小球藻共培养提高小球藻油脂产率的方法，包括：

1)将水稻内生泛菌和小球藻在光照下进行菌藻共培养，培养结束后，得到菌藻共培养液；

2)对菌藻共培养液进行细胞分离，得到小球藻细胞沉淀和内含水稻内生泛菌的上清菌液，将小球藻细胞沉淀经处理后得到小球藻细胞干品；