[发明专利]支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合及其应用

权利要求书

1.一种支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：支撑P450脂肪酸脱羧酶OleT_JE催化脂肪酸脱羧产生α烯烃活性的还原伴侣蛋白组合为铁氧还蛋白(ferredoxin)和铁氧还蛋白还原酶(ferredoxin reductase)和辅酶。

2.按权利要求1所述的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：所述辅酶为NADH或NADPH。

3.按权利要求1所述支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：所述铁氧还蛋白和铁氧还蛋白还原酶组合按摩尔浓度比为(1-10):1的比例混合。

4.按权利要求1所述支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：所述组合中铁氧还蛋白和铁氧还蛋白还原酶分别源于聚球藻(Synechococcus elongatus PCC 7942)或谷棒杆菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)。

5.按权利要求1或3所述支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：所述来源于聚球藻(Synechococcus elongatus PCC 7942)的铁氧还蛋白分别为Fdx_0338(SEQ ID NO.1)，Fdx_0698(SEQ ID NO.2)，Fdx_0814(SEQ ID NO.3)，Fdx_0898(SEQ ID NO.4)，Fdx_1499(SEQ ID NO.5)，Fdx_1749(SEQ ID NO.6)，Fdx_2581(SEQ ID NO.7)或其功能等同体；

所述来源于谷棒杆菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)的铁氧还蛋白分别为Fdx_2856(SEQ ID NO.8)，Fdx_0526(SEQ ID NO.9)，Fdx_1057(SEQ ID NO.10)或其功能等同体。

6.按权利要求1或3所述支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：所述来源于聚球藻(Synechococcus elongatus PCC 7942)的铁氧还蛋白还原酶为FdR_0978(SEQ ID NO.11)或其功能等同体；

所述来源于谷棒杆菌(Corynebacterium glutamicum ATCC 13032)的铁氧还蛋白还原酶分别为FdR_2658(SEQ ID NO.12)，FdR_2719(SEQ ID NO.13)或其功能等同体。

7.按权利要求1、4或5所述支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：

所述组合为Fdx_0338，Fdx_0698，Fdx_0814，Fdx_0898，Fdx_1499，Fdx_1749或Fdx_2581铁氧还蛋白分别与同源的铁氧还蛋白还原酶FdR_0978组合；

或，Fdx_0338，Fdx_0698，Fdx_0814，Fdx_0898，Fdx_1499，Fdx_1749或Fdx_2581铁氧还蛋白分别与异源的铁氧还蛋白还原酶FdR_2658或FdR_2719组合；

或，Fdx_2856，Fdx_0526或Fdx_1057铁氧还蛋白分别与同源的铁氧还蛋白还原酶FdR_2658或FdR_2719组合；

或，Fdx_2856，Fdx_0526或Fdx_1057铁氧还蛋白分别与异源的铁氧还蛋白还原酶FdR_0978组合。

8.按权利要求1所述支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合，其特征在于：所述的P450脂肪酸脱羧酶OleT_JE来源于咸海鲜球菌(Jeotgalicoccus sp.ATCC 8456)菌株的P450脂肪酸脱羧酶。

9.一种权利要求1所述的支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合在支撑P450脂肪酸脱羧酶OleT_JE催化脂肪酸脱羧产生α烯烃反应中的应用。

10.按权利要求9所述的权利要求1所述的支撑P450脂肪酸脱羧酶活性的还原伴侣蛋白组合在支撑P450脂肪酸脱羧酶OleT_JE催化脂肪酸脱羧产生α烯烃反应中的应用，其特征在于：所述P450脂肪酸脱羧酶OleT_JE与还原伴侣蛋白组合中各成分的摩尔浓度比为1:(10-50):(5-20)。