[发明专利]一种检测二氯喹啉酸的试纸条及其制备方法和应用有效
申请号: | 201610151290.9 | 申请日: | 2016-03-15 |
公开(公告)号: | CN105807055B | 公开(公告)日: | 2017-10-10 |
发明(设计)人: | 陈黎;范子彦;张颖;崔海峰;潘立宁;胡斌;唐纲岭;刘惠民;冯静;崔华鹏;蔡君兰 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司郑州烟草研究院;国家烟草质量监督检验中心;北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 郑州中民专利代理有限公司41110 | 代理人: | 姜振东 |
地址: | 450001 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 氯喹 试纸 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种检测二氯喹啉酸的试纸条,包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板;其特征在于:在反应膜上具有包被有二氯喹啉酸半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线,在结合物释放垫上喷涂有二氯喹啉酸单克隆抗体-胶体金标记物;所述二氯喹啉酸单克隆抗体是以二氯喹啉酸半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得;所述二氯喹啉酸半抗原-载体蛋白偶联物由二氯喹啉酸半抗原与载体蛋白偶联得到;所述二氯喹啉酸半抗原是由二氯喹啉酸与溴乙酰氯反应得到,其分子结构式为:
。
2.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述二氯喹啉酸半抗原的具体合成方法为:取0.43 g溴乙酰氯,加10 mL氯仿溶解,加30.28 g AlCl3搅拌,室温反应2 h,滴加含有1.0 g二氯喹啉酸的吡啶溶液20 mL,50 ℃反应4 h,停止反应,旋蒸,除去有机溶剂,加水溶解,加稀盐酸调节pH=5,乙酸乙酯萃取,无水硫酸钠干燥,浓缩,得到红色油状物,上硅胶柱,石油醚/乙酸乙酯洗脱分离,得到溴乙酰化二氯喹啉酸半抗原产物,即为二氯喹啉酸半抗原。
3.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫依次粘贴在底板上,且结合物释放垫1/3~1/2被覆盖于样品吸收垫下。
4.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白。
5.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述羊抗鼠抗抗体是以鼠源抗体为免疫原对山羊进行免疫制备获得。
6.一种制备权利要求1-5任一项所述试纸条的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)制备喷涂有二氯喹啉酸单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫;
2)制备具有包被有二氯喹啉酸半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜;
3)将1)和2)制备好的结合物释放垫、反应膜与样品吸收垫、吸水垫和底板组装成试纸条。
7.一种应用权利要求1-5任一项所述试纸条检测植烟土壤中二氯喹啉酸的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
1)对样品进行前处理;
2)用试纸条进行检测;
3)分析检测结果。
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