[发明专利]一种食品可溶性蛋白体内吸收快速测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品科学与工程领域。具体而言，特指：通过对测定可溶性蛋白在体内 的流动速度，利用蠕动泵模拟流速，简单、快速、真实地测定食品可溶性蛋白在体内的吸收 状况。

背景技术

自然界的食物种类差异巨大，各种食物的蛋白质含量、氨基酸组成也都不同，而人 体对这些蛋白质的消化和吸收利用程度也不尽相同。我国是个蛋白质资源缺乏的国家，食 品蛋白质的生物利用度需要大幅度提高，这对于开发新的食品资源、开发各类产品加工工 艺，提升蛋白质的消化、吸收和利用率都有着重要的意义。目前评价蛋白质的生物利用度有 生物学法和非生物学法方法。

经典的生物学方法以美国官方分析化学家协会(AOAC)规定的方法为主流。一般采 用刚断乳约四周龄（刚断奶）的雄性SpragueDawley(SD)大鼠。实验除待测蛋白质外，还需 要酪蛋白及无氮组作对照。除无氮组，其它组的蛋白含量控制在10%左右，且各组关于脂肪， 维生素、糖等营养物质都保持一致。大鼠一般每组10只，分笼饲养，提供充足的食物和水，让 大鼠能自由饮水进食。每天记录进食量，每4-7天称体重，喂养时间为10-28天。在喂食3-4天 后，收集5天粪、尿，测定粪氮、尿氮含量。随后根据这些资料来计算各种生物学指标，进行营 养评价。用生物学方法来衡量蛋白质的营养价值，有一个明显的优势，即它采用动物实验可 以直接得出被测蛋白质在受试动物体内的消化、吸收及利用情况。蛋白质营养品质的好坏 由受试动物体重的增减情况及其体内的氮代谢与平衡决定。

非生物学评价法是将被测蛋白质的氨基酸组成模式与参考或理想蛋白质的组成 模式进行对比，尤其是必需氨基酸模式来评价被测蛋白质的营养价值，或根据实践经验方 法进行测定，从而反映出蛋白质组成与其生物利用率的关系。非生物学评价法方法非常简 单，只需要详细的氨基酸分析资料。但非生物学方法一般是与一标准蛋白质进行比较分析， 不能真实的反映氨基酸在机体内的平衡代谢状况。

目前，对蛋白的消化率的测定主要有两种方法：体内法和体外法。体外消化法是利 用消化酶在试管内进行消化试验，从而快速测定原料的相对利用率，其优点是简单、快捷。 但是，蛋白在体内的消化、吸收、利用是一个非常复杂的过程，体外消化法只是测定了蛋白 在体外简单环境下的消化值，不能真实地反应体内消化的实际情况。体内法即AOAC提供的 蛋白质营养评价方法，采用动物实验对生长期SD大鼠进行氮代谢的试验研究，能够准确评 价蛋白的生物利用度。目前，国内外对蛋白的生物利用度研究较少，研究方法也相对落后。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，首次提供一种食品可溶性蛋白质 在体内吸收的快速测定技术。

本发明技术方案的总体描述：一种食品可溶性蛋白体内吸收快速测定方法，按照 下述步骤进行：（1）取大鼠在屏障环境饲养作为实验准备；将待测的食品可溶性蛋白质定量 后溶于纯水或其它溶剂，再与0.2ml的有色试剂混合，然后对大鼠进行灌胃。

（2）1小时后对大鼠进行解剖，察看可溶性蛋白在大鼠肠内的运行距离和到达的位 置，计算出样品从灌胃开始到达结肠部分所需要的时间，根据胃到达结肠位置的距离计算 出样品在体内的流速。

（3）将蠕动泵设定成所计算出的流速后。取另一只清洁以上180-220克大鼠，进行 麻醉，行腹腔解剖术，暴露出胃贲门位置和结肠位置，在两端行插管术。将胃端插管连接入 蠕动泵，以测定的流速泵入待测蛋白，在结肠末端回收待测蛋白液体。根据两端蛋白含量的 差值计算出蛋白质吸收率。

所述的可溶性蛋白，是指能溶于水或其它溶剂的蛋白质，包括蛋白的降解产物多 肽。

所述的其它溶剂是指对动物的胃肠道没有损伤并可以溶解蛋白的物质；有色试剂 为墨汁或其他不影响吸收的物质。

所述的大鼠是指实验动物SpragueDawley(SD)大鼠；所述的清洁级SD大鼠是指在 微生物控制方面，除要求必须不带有人兽共患病原和烈性传染病病原及常见传染病病原之 外，还要求排除对科学实验研究干扰大的病原体的SD大鼠；

所述的灌胃是指利用灌胃针将含有可溶性蛋白的溶液经口直接灌到大鼠胃中的过程。 所述的蠕动泵是一种能够精确控制液体流速的设备，在本发明中用来控制待测蛋白在胃肠 内的流动速度。

本发明的突出优点表现为：