[发明专利]一种寨卡病毒荧光PCR检测试剂盒在审
| 申请号： | 201610147785.4 | 申请日： | 2016-03-10 |
| 公开（公告）号： | CN105734171A | 公开（公告）日： | 2016-07-06 |
| 发明（设计）人： | 李明;何皖平;周其伟;蒋析文;高秀洁;夏乔;尤欢;叶爱华;吴洁 | 申请（专利权）人： | 中山大学达安基因股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510665 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 荧光 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种寨卡病毒荧光PCR检测试剂盒，包括：1)RT-PCR反应液、引物探针混合液、RT-PCR反应酶系、DEPCH2O，阴性质控品、阳性质控品和2)分隔并集中包装这些试剂瓶或管的包装盒，其中引物探针混合液由寨卡病毒特异性的正、反向引物及特异性的探针组成，其特征在于：特异性的正向和反向引物分别是5’-TACAAGTACCATCCTGACTCCC-3’和5’-CYGTCAGTTGYACTCCATTCTC-3’；特异性的探针的序列是5’-AGCTCCCCTTCYACTGATYTCCACAT-3’。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征还在于所述探针的5’端和3’端分别结合有荧光发生基团FAM和荧光淬灭基团BHQ1。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征还在于引物探针混合液中引物浓度为0.2～0.5μmol/L，探针浓度为0.1～0.25μmol/L。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征还在于RT-PCR反应液由pH值为8.0～8.8的50mmol/LTris-HCl、3～8mmol/LMgCl2、150～350mmol/LKCl组成。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其中RT-PCR反应酶系由热启动Taq酶、逆转录酶、dNTPs组成，特征在于每人份RT-PCR反应酶系中热启动Taq酶的用量为5～10U；逆转录酶用量为1.5～5U；dNTPs为6～12mmol。
6.根据权利要求1的试剂盒，其特征还在于PCR扩增的条件为：50℃15分钟，95℃5分钟；95℃15秒，55℃35秒，40个循环。
7.根据权利要求1的试剂盒，还提供了阴性质控品和阳性质控品，其特征在于阴性质控品为生理盐水，阳性质控品为人工合成的含有NS1基因目的基因的体外转录RNA。
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