[发明专利]一种高活力漆酶液的制备方法

权利要求书

1.一种高活力漆酶液的制备方法，包括如下步骤：

步骤一，使用固体斜面活化栓菌以制备斜面种子；所述栓菌保藏编号为：CCTCC NO：M2015191；

步骤二，将斜面种子在种子培养基中接种培养以制备种子培养液；所述种子培养基包括一级种子培养基和二级种子培养基，所述斜面种子先接种入一级种子培养基进行液体摇瓶培养得一级种子培养液，再将一级种子培养液接种入二级种子培养基在发酵罐中进行种子液扩大培养得二级种子培养液；制备所述二级种子培养液的发酵罐发酵工艺参数为：终装料系数为70~80%，罐压设定为0.03-0.06MPa，温度控制为28~30℃，搅拌转速控制在300~500 r/min之间，通气量控制在0.3~0.6 vvm之间，溶解氧浓度控制在30%~50%之间；

步骤三，将种子培养液在发酵培养基中进行发酵产漆酶；

步骤三中发酵的工艺参数为：罐压设定为0.03~0.08 MPa，温度控制为28~30℃，搅拌转速控制在300~700 r/min之间，通气量控制在0.3~0.8 vvm之间，溶解氧浓度控制在20%~60%之间。

2.根据权利要求1所述高活力漆酶液的制备方法，其特征在于：所述二级种子培养基的配方为：每L二级种子培养基含有：葡萄糖10 g，10%麸皮浸出汁100 g，氯化铵5 g，酵母粉2g，五水硫酸铜0.1 g，氯化钠1 g，磷酸二氢钾1 g。

3.根据权利要求1所述高活力漆酶液的制备方法，其特征在于：步骤二和步骤三的发酵过程中控制pH =4~6。

4.根据权利要求1所述高活力漆酶液的制备方法，其特征在于：所述步骤三中发酵培养基的配方为：每L含有麦芽糖、葡萄糖之一或其混合物10~40 g，10%麸皮浸出汁80~120g，氯化铵、酒石酸铵、豆粕、豆饼粉之一或其混合物5~10 g，酵母粉、蛋白胨之一或其混合物2.5g，五水硫酸铜0.1~0.4 g，氯化钠1 g，磷酸二氢钾2 g。

5.根据权利要求1所述高活力漆酶液的制备方法，其特征在于：所述步骤三中还包括在发酵过程中添加营养液。

6.根据权利要求5所述高活力漆酶液的制备方法，其特征在于：所述营养液的配方为：每L含有麦芽糖、葡萄糖、蔗糖之一或其混合物300~450 g，五水硫酸铜0~20 g，硝酸铵、硝酸钾或其混合物50~100 g，吐温-80 2~5g。