[发明专利]使用分光光度法测定氨基葡萄糖的方法

权利要求书

1.测定制品中的氨基葡萄糖或其类似物含量的方法，氨基葡萄糖的类似物选自：盐酸氨基葡萄糖、硫酸氨基葡萄糖、氨基葡萄糖硫酸钾盐、氨基葡萄糖枸橼酸钙，该方法使用分光光度法进行测定，包括如下步骤：

(1)标准氨基葡萄糖储备液的制备：取盐酸氨基葡萄糖对照品1-200mg，精密称定，置于25ml容量瓶中，用缓冲溶液稀释并定容至刻度，作为对照品储备液；所述缓冲溶液是pH6-8的乙酸钠溶液，并且该缓冲溶液中还添加有重量/体积百分比浓度为0.15％的酒石酸钾钠；

(2)样品溶液的制备：取相当于0.1-250mg氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置于100ml容量瓶中，加上一步骤所用缓冲溶液稀释，超声提取15min，定容至刻度，过滤，续滤液作为供试品溶液；

(3)标准对照品及供试品显色及测定：精密量取对照品储备液适量，置于25ml比色管中，加入0.5％-10％的茚三酮溶液0.5-10ml，再加入0-10ml上一步骤所用缓冲溶液，混匀；精密量取供试品溶液适量，置于25ml比色管中，加入0.5％-10％的茚三酮溶液0.5-10ml，再加入0-10ml上一步骤所用缓冲溶液，混匀；将对照品及供试品待显色溶液置于70-100℃水浴中显色10-100min，取出迅速冷却至室温，加入上一步骤所用缓冲溶液定容至25ml，混匀；采用分光光度计在200-800nm波长下对显色后的对照品溶液及供试品溶液的吸光度进行测定；

(4)根据对照品溶液和供试品溶液的吸光度以及对照品溶液浓度计算所述制品中的氨基葡萄糖或其类似物的含量。

2.根据权利要求1的方法，其中所述制品选自：包含氨基葡萄糖或其类似物的食品、药品，或者制备它们的氨基葡萄糖或其类似物原料。

3.根据权利要求1的方法，步骤(1)中，取盐酸氨基葡萄糖对照品20-50mg，精密称定，置于25ml容量瓶中，配制对照品储备液。

4.根据权利要求1的方法，所述缓冲溶液的浓度是0.1～0.3mol/L。

5.根据权利要求1的方法，所述缓冲溶液的浓度是0.2mol/L。

6.根据权利要求1的方法，步骤(2)中，所取的供试品中精密称取相当于含50-150mg氨基葡萄糖的供试品，以用于制备供试品溶液。

7.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中还包括采用分光光度计在200-800nm波长范围内对显色后的对照品溶液进行扫描以确定其最大吸收波长。

8.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中对照品溶液及供试品溶液在氨基葡萄糖的最大吸收波长处测定吸光度。

9.根据权利要求1的方法，其中采用分光光度计在560～570nm波长下对显色后的对照品溶液及供试品溶液的吸光度进行测定。

10.根据权利要求1的方法，其中采用分光光度计在565nm波长下对显色后的对照品溶液及供试品溶液的吸光度进行测定。

11.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中，分别精密量取对照品储备液和供试品溶液各0.5～1ml置于25ml比色管中，以进行显色反应。

12.根据权利要求1至11任一项的方法，步骤(3)中，茚三酮溶液浓度为1％～5％。

13.根据权利要求1至11任一项的方法，步骤(3)中，每支比色管中的茚三酮溶液的添加量为0.5～2ml。

14.根据权利要求1至11任一项的方法，步骤(3)中，在添加茚三酮溶液后，再加入5-10ml缓冲溶液，接着进行加热显色反应。

15.根据权利要求1至11任一项的方法，步骤(3)中，在热水浴中显色反应处理50～100min。