[发明专利]一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的制备方法在审
申请号: | 201610112568.1 | 申请日: | 2016-03-01 |
公开(公告)号: | CN105685477A | 公开(公告)日: | 2016-06-22 |
发明(设计)人: | 刘唤明;刘颖;洪鹏志 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学 |
主分类号: | A23K10/18 | 分类号: | A23K10/18;A23K10/30 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 524088 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 富含 枯草 菌素 中草药 有效成分 抗生素 替代 制备 方法 | ||
1.一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的制备方法,其特征在 于:该方法包括如下步骤:
(1)将斜面保藏的能产枯草菌素的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)HL-1接入到灭 菌后冷却的LB液体培养基中,于37℃、150r/min培养16h,制备成枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HL-1种子液备用;
(2)将中草药粉碎后过60目筛备用;
(3)将步骤(2)粉碎后中草药加入到发酵罐中,并向发酵罐中加入水和营养物,混匀后 得到发酵培养基;
(4)将步骤(3)获得的发酵罐中的培养基于121℃灭菌20min;
(5)将灭菌后的发酵罐中的培养基冷却至室温,然后接入步骤(1)所制备的枯草芽孢杆 菌(Bacillussubtilis)HL-1种子液;
(6)发酵过程的控制:发酵温度为28℃~30℃,无菌空气通入量为0.5vvm~2.5vvm,发 酵罐的转速为150rpm~450rpm,发酵时间为35~45h;
(7)成品处理:发酵结束后,发酵液经过滤去掉沉淀,收集上清液;上清液经真空浓缩至 原体积的1/3~1/5;然后将浓缩液与吸附剂按质量比为1~3:1的比例进行混合吸附,吸附 体系经干燥和粉碎后即可制备成饲用抗生素替代物成品。
2.根据权利要求1所述的一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的 制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中所用的枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)HL-1在 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.10379。
3.根据权利要求1所述的一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的 制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中的中草药为甘草、连翘、车前草、苏子、五味子、马鞭 草中的一种或其中两种以上的混合物。
4.根据权利要求1所述的一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的 制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中的中草药的加入量以添加的中草药的质量占水总质 量百分比计,为5%~20%。
5.根据权利要求1所述的一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的 制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中的营养物为由葡萄糖、蛋白胨、氯化亚铁和磷酸氢二 钾所组成的混合物。
6.根据权利要求1所述的一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的 制备方法,其特征在于:所述步骤(3)中的营养物的加入量以添加的营养物的质量占水总质 量百分比计,分别为:葡萄糖0.01%~5%,蛋白胨0.01%~5%,氯化亚铁0.01%~5%,磷酸氢二 钾0.01%~5%。
7.根据权利要求1所述的一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的 制备方法,其特征在于:所述步骤(5)中枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)HL-1种子液的 接种量以接入种子液的质量占发酵培养基总质量百分比计,为0.1%~8%。
8.根据权利要求1所述的一种富含枯草菌素和中草药有效成分的饲用抗生素替代物的 制备方法,其特征在于:所述步骤(7)中所用的吸附剂为玉米芯、稻壳粉、玉米粉、贝壳粉和 沸石粉中的一种。
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