[发明专利]一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及活性物质检测领域，具体涉及一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法。

背景技术

桑椹，桑树的成熟果实，桑椹又叫桑果、桑泡儿，桑椹的成熟鲜果味甜汁多，是人们常食的水果之一。在药效方面，桑椹性味甘寒，具有补肝益肾、生津润燥、乌发明目等功效。桑果古来就是百姓常采用的一种利尿，保健，消暑的鲜果，在本草纲目中有记载其特殊功效。在现代中药学中，桑椹通常加工成桑椹颗粒。

绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。桑椹中含有少量的绿原酸，但桑椹的产地较多，不同产地中绿原酸的含量相差较大，这就导致最终的桑椹颗粒中的绿原酸含量差异也较大，这势必会导致桑椹颗粒的药效不稳定，因此有必要研究一种桑椹及其制品中绿原酸的检测方法，为桑椹颗粒的生产及其质量检测提供指导。

发明内容

(一)要解决的技术问题

针对现有技术中没有专门针对桑椹及其制品中的绿原酸的检测方法的缺陷，本发明提供一种利用高效液相色谱法检测桑椹及其制品中绿原酸的方法。

(二)技术方案

本发明所述的方法，其步骤为，将待测桑椹样品进行预处理后，采用高效液相色谱法进行检测；

其中，所述预处理的方法为，将待测桑椹样品溶于水，再对其进行加热回流或超声处理；

所述高效液相色谱的检测条件为，采用C18色谱柱，流动相为乙腈和0.2～0.4％磷酸水溶液的混合液，二者的体积比为10～20:80～90。

本发明所述的方法，所述水溶液中待测桑椹样品的浓度，按桑椹干粉计，与水的质量体积比为1～5：100；所述桑椹干粉中水分的含量为15～18％；若待测样品为新鲜的桑椹，可将其干燥到上述含水量后进行测试。

本发明所述的方法，若待测样品为桑椹干粉，对其进行加热回流，加热回流的时间为1～3h；回流1～2次。

本发明所述的方法，所述水溶液中待测桑椹样品的质量浓度，按桑椹颗粒计，与水的质量体积比为0.5～1.5:100；对其进行超声处理，所述超声处理的时间为10～15min，功率280～350W，频率40～50kHz；

本发明中所述的桑椹样品与水的质量体积比的单位g/mL或kg/L等与g/mL相对应的单位；

所述桑椹颗粒的制备方法为将桑椹鲜果加水煎煮二次，每次2～3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，加辅料适量，混匀，制成颗粒，干燥，即得。

本发明所述的方法，待测桑椹样品的粒度为20～80目。

本发明所述的方法，理论塔板数以绿原酸峰计算不低于4000。

优选的，所述C18色谱柱的规格为250×4.6mm，5μm。本发明所述的C18色谱柱优选KromasilC18色谱柱。

本发明所述的方法，检测器检测波长为327nm，流动相的流速为0.7～0.9ml/min，柱温为室温，进样量为5～10μl。

本发明所述的方法，检测之前制备绿原酸浓度与峰面积的标准曲线，所述标准曲线的线性范围为1.300～312.000μg/mL。

优选的，本发明所述的方法包括如下步骤：

1)确定检测条件：色谱柱：C18色谱柱250×4.6mm，5μm，流动相：体积比为10～20：80～90的乙腈和0.3％磷酸水溶液的混合液，检测波长：327nm，流速：0.7～0.9ml/min，柱温：室温，进样量：10μl，理论塔板数以绿原酸峰计算不低于4000；

2)标准曲线的绘制：绘制线性范围为1.300～312.000μg/mL的绿原酸标准曲线；

3)样品的检测：取含水量为15～18％，粒度为20～40的桑椹干粉，配成质量浓度为1.5～2.5％的水溶液，加热回流提取1.0～2h，取滤液作为供试品溶液；或取粒度为60～80的桑椹颗粒，将其配成质量浓度为0.8％～1.5％的水溶液，在功率280～350W，频率40～50kHz的条件下超声处理10～15min，取滤液作为供试品溶液；

4)将上述两种供试品溶液按照步骤1)所述的方法进行检测。

(三)有益效果

本发明所述的方法具有如下有益效果：

1)本发明采用水提法提取桑椹中的绿原酸，该工艺稳定可靠、绿色环保，提取得率较高。

3)本发明所述的在预处理过程中，合理限定了待测桑椹样品与水的相对用量，可对桑椹中的绿原酸进行最大限定的提取。