[发明专利]一种转人神经生长因子基因的小鼠及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种转人神经生长因子基因的小鼠，其特征在于，所述转人神经生 长因子基因的小鼠的基因组中包含人神经生长因子基因序列，所述转人神 经生长因子基因的小鼠的唾液腺特异表达人神经生长因子。

2.根据权利要求1所述的转人神经生长因子基因的小鼠，其特征在于， 所述人神经生长因子基因序列如SEQIDNO:1所示。

3.根据权利要求2所述的转人神经生长因子基因的小鼠，其特征在于， 所述人神经生长因子基因序列整合在所述转人神经生长因子基因的小鼠的 第5号染色体上。

4.根据权利要求3所述的转人神经生长因子基因的小鼠，其特征在于， 所述人神经生长因子基因序列整合在所述转人神经生长因子基因的小鼠的 第5号染色体的quaninenucleotide-bindingproteinsubunitalpha-12基因与 caspaserecruitmentdomain-containingprotein11基因间的非编码间隔序列上 的一个“TTAA”位点中。

5.一种转人神经生长因子基因的小鼠的制备方法，所述转人神经生长 因子基因的小鼠通过转基因技术将人神经生长因子基因序列整合到小鼠基 因组中，并能在所述转人神经生长因子基因的小鼠后代中稳定的遗传，其 特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)构建转座子载体，所述转座子载体包含如SEQIDNO:1所示的人 神经生长因子基因序列、如SEQIDNO:5所示的腮腺分泌蛋白基因启动子 序列、如SEQIDNO:6所示的转座子piggyBac5’末端重复序列和如SEQID NO:7所示的转座子piggyBac3’末端重复序列；

(2)将构建好的转座子载体注射至小鼠受精卵的雄原核，然后将注射 后的小鼠受精卵移植至代孕母鼠的子宫内，饲养代孕母鼠至小鼠出生；

(3)对出生的小鼠进行检测，筛选出人神经生长因子基因能在后代中 稳定遗传的转人神经生长因子基因的小鼠。

6.根据权利要求5所述的转人神经生长因子基因的小鼠的制备方法， 其特征在于，所述转座子载体的序列如SEQIDNO:8所示。

7.根据权利要求6所述的转人神经生长因子基因的小鼠的制备方法， 其特征在于，所述转座子载体整合在所述转人神经生长因子基因的小鼠的 第5号染色体的quaninenucleotide-bindingproteinsubunitalpha-12基因与 caspaserecruitmentdomain-containingprotein11基因间的非编码间隔序列上 的一个“TTAA”位点中。

8.一种制备人神经生长因子药物的方法，其特征在于，所述方法包括 如下步骤：

1)根据权利要求5-7任一项所述的方法培养转人神经生长因子基因的 小鼠，所述转人神经生长因子基因的小鼠为根据权利要求1-4任一项所述 转人神经生长因子基因的小鼠；

2)从步骤1)中所述转人神经生长因子基因的小鼠的唾液中分离纯化 出人神经生长因子药物。

9.根据权利要求8所述的制备人神经生长因子药物的方法，其特征在 于，所述的人神经生长因子药物能够促进神经生长因子受体细胞增殖。

10.根据权利要求9所述的制备人神经生长因子药物的方法，其特征 在于，所述的人神经生长因子药物能够做成制剂用于人类疾病的治疗。