[发明专利]一种融合蛋白及其应用

权利要求书

1.一种融合蛋白，其中，所述融合蛋白由与猪流行性腹泻病毒抗原性蛋白连接的单体铁蛋白亚基蛋白构成；其中，所述猪流行性腹泻病毒抗原性蛋白为猪流行性腹泻病毒S蛋白片段Sa或Sb或Sc或Sd，所述猪流行性腹泻病毒S蛋白的基因序列为SEQ ID No.3，所述Sa是所述猪流行性腹泻病毒S蛋白的基因序列的第1-1914位基因序列，所述Sb是所述猪流行性腹泻病毒S蛋白的基因序列的第1-2370位基因序列，所述Sc是所述猪流行性腹泻病毒S蛋白的基因序列的第1381-1914位基因序列，所述Sd是所述猪流行性腹泻病毒S蛋白的基因序列的第1381-2370位基因序列；所述单体铁蛋白亚基蛋白为优化的幽门螺杆菌铁蛋白，所述优化的幽门螺杆菌铁蛋白核苷酸序列编码SEQ ID NO.2氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述融合蛋白，其中，所述单体铁蛋白亚基蛋白包含容许所述融合蛋白自身装配成纳米颗粒的域。

3.根据权利要求1所述融合蛋白，其中，所述融合蛋白能够自身装配成纳米颗粒；

其中，所述融合蛋白中所述猪流行性腹泻病毒抗原性蛋白与所述单体铁蛋白亚基蛋白中间连接有柔性蛋白；其中，所述柔性蛋白为氨基酸序列GGSGG、GGSGGGGSGG、GGSGGGGSGGGGSGG、GGSG、GGSGGGSG、GGSGGGSGGGSG、SGG、GSG、GG或NGTGGSG编码的蛋白。

4.一种纳米颗粒，其中，所述纳米颗粒为包含权利要求1-3任一项所述融合蛋白的纳米颗粒，其中，所述融合蛋白包含与所述猪流行性腹泻病毒抗原性蛋白连接的单体铁蛋白亚基蛋白，使得所述纳米颗粒在其表面上包含24个猪流行性腹泻病毒抗原性蛋白单体。

5.一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括权利要求4所述纳米颗粒和兽医学上可接受的载体。

6.根据权利要求5所述的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物中所述纳米颗粒的含量为0.5-200μg/ml。

7.根据权利要求5所述的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物中所述纳米颗粒的含量为5-100μg/ml。

8.根据权利要求5所述疫苗组合物，其中，所述载体包括佐剂。

9.根据权利要求8所述疫苗组合物，其中，所述佐剂包括铝胶佐剂、皂苷、油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂、丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基(alkenyl)衍生物的共聚物、RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽或Gel佐剂中的一种或几种。

10.根据权利要求8所述疫苗组合物，其中，所述佐剂为铝胶佐剂。

11.根据权利要求8所述疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物中所述佐剂的体积比为5％-30％。

12.根据权利要求8所述疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物中所述佐剂的体积比为20％。

13.根据权利要求5所述疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物还包括其他抗原；其中，所述其他抗原包括猪传染性胃肠炎病毒抗原、猪轮状病毒抗原、猪圆环病毒抗原、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原、副猪嗜血杆菌抗原、猪细小病毒抗原、大叶性肺炎放线杆菌抗原、大肠杆菌抗原、猪萎缩性鼻炎抗原、猪伪狂犬病病毒抗原、猪霍乱病原抗原、猪流感病毒抗原中的一种或多种。

14.根据权利要求13所述疫苗组合物，其中，所述其他抗原为猪传染性胃肠炎病毒抗原。