[发明专利]一种检测水产品中电子束辐照剂量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种水产品质量与安全的分析方法，尤其涉及一种操作简便、快速高效的检测水产品中电子束辐照剂量的方法。

背景技术

食品辐照技术作为一类冷加工技术越来越广泛的应用到食品工业中，对辐照食品进行有效监管不仅是消费者的迫切愿望，而且是保障辐照食品健康发展的必然要求。当前辐照食品的检测方法主要是γ射线辐照为基础建立起来的，而且多集中香辛料、禽肉类、干果类等产品上。

辐照杀菌对食品的作用包括初级作用和次级作用，初级作用即微生物细胞质间质受到高能照射后发生的电离作用和化学作用，使物质形成离子、激发态和分子碎片；次级作用是水分等经辐照发生电离而产生H、OH自由基和过氧化物再与细胞内其他物质作用，发生交联反应。这两种作用引起微生物DNA、RNA、蛋白质、脂类等有机分子中化学键的变化，蛋白质与DNA分子交联，DNA序列中碱基的改变，从而导致微生物细胞的死亡，达到延长食品储藏时间和保鲜的目的。

辐照食品的潜在安全性问题存在争议，在日内瓦召开的FAO/IEAE/WHO食品辐照联合专家委员会指出“总体平均剂量为10kGy以下辐照的任何食品，没有毒理学危险，无需进行毒理学评价。同时在营养学上和微生物学上也是安全的”。但不当的辐照会对食品的颜色、味道、营养产生一些副作用，比如有臭味、色泽的改变和营养成分的破坏，辐解产物的存在对人的健康也存在安全隐患。

对于辐照食品的检测方法一般有ESR电子自旋共振、热释光、DNA彗星分析法与邻酪氨酸检测法等，但是ESR电子自旋共振检测设备成本较高，检测结果需要专业人员解析，一定程度上限制了它的广泛应用；热释光方法操作繁琐，对样品数量和种类要求较高，对混合样品敏感性较低；DNA彗星分析检测的准确性有待考究。

国内外以辐照前后脂类、蛋白质、碳水化合物、DNA等成分的变化为出发点，进行了一系列检测技术的开发，其中邻酪氨酸是在辐射过程中由苯丙氨酸转化而成的一种标示物，可以用于蛋白质含量较高的辐照食品的检测，但是当前研究大部分针对γ射线辐照水产品的检测，而且对邻酪氨酸与辐照剂量的关系尚不明确。

发明内容

本发明的目的在于为了解决现有检测电子束辐照剂量没有快速有效的方法的缺陷而提供一种操作简便、快速高效的检测水产品中电子束辐照剂量的方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种检测水产品中电子束辐照剂量的方法，所述方法为首先构建电子束辐照水产品中邻酪氨酸含量与电子束辐照剂量之间的线性方程，然后利用高效液相色谱法检测电子束辐照后水产品中邻酪氨酸的含量，最后通过线性方程得到电子束辐照剂量。在本技术方案中，食品中苯丙氨酸在辐照的作用下雨辐照产生的羟基自由基反应，生产酪氨酸和两种酪氨酸异构体，即邻酪氨酸(Ortho-tyrosine，简写为o-tyrosine)和间酪氨酸(meta-tyrosine，简写为m-tyrosine)，酪氨酸存在与机体本身，因此邻酪氨酸和间酪氨酸常被用作辐照标识物来鉴别食品是否经过辐照，而邻酪氨酸和间酪氨酸由于极性相似较难分离，故邻酪氨酸常被用于辐照食品的检测。本发明通过检测电子束辐照后邻酪氨酸含量的多少来确定辐照剂量，为辐照食品的安全性提供理论基础，本发明的检测方法快速简便、精确度高。

作为优选，包括以下步骤：

a)原料的选取与预处理：取扇贝、基围虾与鲈鱼进行1-10kGy辐照剂量的电子束辐照处理，匀浆后置于-40℃下保存5-10h；

b)前处理：取步骤a)得到的样品1-1.2g，置于具塞离心管中，加入5-6.5mL质量分数为0.2％甲酸水溶液，20000-22000r/min均质4-5min，超声20-35min，10000-12000rpm4℃下离心25-30min，取上清，加入10-15mL丙酮，-40℃放置3-5h，10000-12000rpm4℃下离心8-12min，取上清液于50-55℃悬蒸，除去有机溶剂后冻干，用1-1.2mL质量分数为0.2％甲酸复溶，过0.22μm有机滤膜，上机检测。

作为优选，高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱：AglientEclipse-C18柱(4.6mm×250mm，5.0μm)色谱柱；流动相：A：0.1％甲酸，B：乙醇(20:80，v/v，乙醇中含有体积比为0.5％的冰乙酸和0.3％的三乙胺)；柱温：30℃，波长：Ex:275nm，Em：305nm，进样量：20μL。