[发明专利]一种琥珀酰‑β‑环糊精修饰的莱姆病检测用蛋白质芯片及其制备与应用有效
| 申请号: | 201610084174.X | 申请日: | 2016-02-04 |
| 公开(公告)号: | CN105548577B | 公开(公告)日: | 2017-09-19 |
| 发明(设计)人: | 杜卫东;黄娜丽;叶雷 | 申请(专利权)人: | 安徽医科大学 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569;G01N33/553 |
| 代理公司: | 上海光华专利事务所31219 | 代理人: | 郭婧婧,许亦琳 |
| 地址: | 230032*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 琥珀 环糊精 修饰 莱姆 检测 蛋白质 芯片 及其 制备 应用 | ||
1.一种用于莱姆病检测的蛋白质芯片,包括固相载体和固定于所述固相载体上的捕获分子,所述捕获分子含有伯氏疏螺旋体变量主要蛋白样序列表达E蛋白(VlsE);所述固相载体为表面依次修饰有16-氨基-1-十六烷硫醇和琥珀酰-β-环糊精的金箔芯片;琥珀酰-β-环糊精上由羧基活化而成的琥珀酰亚胺基与固相载体上所修饰的16-氨基-1-十六烷硫醇中的氨基结合;伯氏疏螺旋体变量主要蛋白样序列表达E蛋白(VlsE)与琥珀酰-β-环糊精结合。
2.根据权利要求1所述的蛋白质芯片,其特征在于,所述固相载体上伯氏疏螺旋体变量主要蛋白样序列表达E蛋白(VlsE)的密度范围是:3.9x10-4ng/mm2~0.41ng/mm2。
3.根据权利要求1~2任一权利要求所述用于莱姆病检测的蛋白质芯片中固相载体的制备方法,包括步骤:
(1)将琥珀酰-β-环糊精上的羧基活化为琥珀酰亚胺基,获得活化后的琥珀酰-β-环糊精;
(2)在金箔芯片上修饰16-氨基-1-十六烷硫醇,获得16-氨基-1-十六烷硫醇修饰的金箔芯片;
(3)在步骤(2)中所得16-氨基-1-十六烷硫醇修饰的金箔芯片上修饰步骤(1)所得活化后的琥珀酰-β-环糊精,获得固相载体。
4.根据权利要求1~2任一权利要求所述用于莱姆病检测的蛋白质芯片的构建方法,包括步骤:将捕获分子进行稀释,获得捕获分子溶液;采用常规方法将捕获分子溶液分别点阵于固相载体表面的不同位置,并固定。
5.根据权利要求1~2任一权利要求所述用于莱姆病检测的蛋白质芯片在制备伯氏疏螺旋体检测试剂盒中的用途。
6.一种伯氏疏螺旋体检测试剂盒,所述试剂盒包括如权利要求1~2任一权利要求所述用于莱姆病检测的蛋白质芯片。
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