[发明专利]一种富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法

权利要求书

1.一种富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法，其特征在于：首先制备蛹虫草复合酶系溶液，然后利用蛹虫草复合酶系溶液水解转化蛹虫草子实体生物活性物质，水解反应完全后，动态循环提取，微孔滤膜过滤，真空减压浓缩，即得到富含生物活性物质的蛹虫草提取物；

其中，蛹虫草复合酶系溶液的制备方法为：将纯培养的蛹虫草菌丝体基质投入搅拌式提取罐中，按重量比加入5～10倍纯净水，提取温度25～45℃，搅拌转速80～120r/min，提取时间2～4h，滤膜过滤，滤液中加入3～5倍体积95％食用乙醇，降温至4～10℃，12000～20000r/min转速离心机离心分离，得到复合酶系沉淀物，用8～12倍体积食品级乙酸/乙酸钠缓冲溶液溶解，得到蛹虫草复合酶系溶液。

2.按照权利要求1所述富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法，其特征在于，利用蛹虫草复合酶系溶液水解转化蛹虫草子实体生物活性物质的过程为：在净制的蛹虫草子实体中加入12～20倍重的纯净水，加入体积比为0.1～1％的蛹虫草复合酶系溶液，25～45℃下进行复合酶系水解反应，反应时间为2～6h。

3.按照权利要求1所述富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)、蛹虫草复合酶系溶液的制备：将纯培养的蛹虫草菌丝体基质投入搅拌式提取罐中，按重量比加入5～10倍纯净水，提取温度25～45℃，搅拌转速80～120r/min，提取时间2～4h，滤膜过滤，滤液中加入3～5倍体积95％食用乙醇，降温至4～10℃，12000～20000r/min转速离心机离心分离，得到复合酶系沉淀物，用8～12倍体积食品级乙酸/乙酸钠缓冲溶液溶解，得到蛹虫草复合酶系溶液；

(2)、蛹虫草复合酶系水解反应：在净制的蛹虫草子实体中加入12～20倍重的纯净水，加入体积比为0.1～1％的蛹虫草复合酶系溶液，25～45℃下进行复合酶系水解反应，反应时间为2～6h；

(3)、动态循环提取：蛹虫草复合酶系水解反应完全后，提取液通过换热片进行循环动态加热保温，提取温度80～90℃，提取时间2～6h，过滤后的蛹虫草子实体按上述工艺参数再次提取，合并两次提取液；

(4)、微孔滤膜过滤：将上述提取液高压输送并通过微孔滤膜过滤，输送压力为0.2～0.5MPa，微孔滤膜孔径0.2～1.0μm，滤液置于暂存罐中；

(5)、真空减压浓缩：浓缩温度55～70℃，真空度-0.06～-0.08MPa，浓缩至固形物含量至60％～65％Brix(w/w)，即得到富含生物活性物质的蛹虫草提取物。

4.按照权利要求3所述富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法，其特征在于：步骤(1)中乙酸/乙酸钠缓冲溶液pH范围为4.0～6.0。

5.按照权利要求3所述富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法，其特征在于：步骤(2)中，先将净制的蛹虫草子实体投入强制式外循环提取罐中，再加入15～18倍蛹虫草子实体重量的纯净水。

6.按照权利要求1或3所述富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)、蛹虫草复合酶系溶液的制备：将10kg纯培养的蛹虫草菌丝体基质投入搅拌式提取罐中，按重量比加入8倍纯净水，提取温度35℃，搅拌转速100r/min，提取时间3h，10μm孔径滤膜过滤，滤液中加入4倍体积95％食用乙醇，降温至6℃，16000r/min转速离心机离心分离，得到酶系沉淀物，用10倍体积pH为5.0的食品级乙酸/乙酸钠缓冲溶液溶解，即得到蛹虫草复合酶系溶液；

(2)、蛹虫草复合酶系水解反应：将100kg净制的蛹虫草子实体投入强制式外循环提取罐中，加入16倍蛹虫草子实体重量的纯净水，保持提取温度35℃，加入体积比为1.0％的蛹虫草复合酶系溶液，复合酶系水解反应5h；

(3)、动态循环提取：蛹虫草复合酶系水解反应完全后，提取液通过换热片进行循环动态加热保温，提取温度85℃，提取时间4h；过滤后的蛹虫草子实体按上述工艺参数再次提取，合并两次提取液；

(4)、微孔滤膜过滤：将上述提取液高压输送并通过微孔滤膜过滤，输送压力为0.4MPa，微孔滤膜孔径0.45μm，滤液置于暂存罐中；

(5)、真空减压浓缩：浓缩温度65℃，真空度-0.06MPa，浓缩至固形物含量至65％Brix(w/w)，浓缩结束，得到富含生物活性物质的蛹虫草提取物。