[发明专利]一种检测白酒中甲基苯酚类物质含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析检测领域，具体涉及一种检测白酒中甲基苯酚类物质含量的方法。

背景技术

中国传统固态发酵工艺中，酒糟在发酵过程中会生成酒精和众多的微量香味物质，其中就包含了种类众多的酚类物质。4-甲基苯酚、2-甲基苯酚和3-甲基苯酚具有相似的酚类气味，据研究这三类物质在白酒中的含量虽然很少，但是它们的气味阈值很低，很容易对白酒的整体气味产生严重的影响。目前对于白酒中酚类物质的研究主要集中在4-甲基苯酚上，而对于2-甲基苯酚和3-甲基苯酚的研究则没有见到相关报告。

现有检测白酒中甲基苯酚类物质主要有以下几种方法：

1、国内轻工业部食品发酵研究所1980年以茅台酒为主要研究对象，采用化学衍生法结合GC-FID/GC-MS对白酒中挥发性酚元化合物进行的分析研究中，需要进行大量的萃取前处理，并且还需要进行衍生化步骤，最终也只对白酒中的4-甲基苯酚进行了估算。

2、1990年青岛大学、中国医科院药研所和山东大学陆懋荪、刘春胜、阎长泰用溶剂萃取法提取白酒中的6种挥发酚(青岛大学学报，1990，3(1)，102～105)，此方法的大致步骤为：取50mL酒样，用2N NaOH调节pH值为12.5，转移到交换柱上，以5-l0/min流速通过柱子，用25mL NaOH的甲醇溶液及25mL水淋洗除去杂质，用25mL 4N HCl及2mL水洗脱，收集后用3x10mL二氯甲烷萃取；再用50mL丙酮-水(4︰1，V/V)洗脱，收集后用3x10mL二氯甲烷萃取；合并萃取液，用10mL 2％NaHCO₃溶液洗涤除去有机酸，以无水Na₂SO₄脱水后浓缩至0.5mL，取0.20mL浓缩液于1mL反应瓶中，加0.5mL衍生化试剂和数粒K₂CO₃，于60～70℃水洛回流2.5h，用N₂吹干，加0.5mL正己烷溶解残留物，进行气相色谱分析。由此可见，该方法前处理步骤相当繁琐，而且只在摸拟酒样进行了实验，6种挥发酚平均回收率为79％，苯酚的回收率为65％，6种挥发酚平均RSD值为6.1％，不能达到检测方法回收率为80～120％，RSD值＜5％的要求，因此没有建立白酒中挥发性酚的分析检测方法。

3、2010年江南大学生物工程学院朱燕.、范来文、徐岩应用浸入固相微萃取(DI-SPME)与气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术DI-SPME和GC-MS分析白酒中游离酚类化合物(食品与发酵工业，2010，36(10)：138-143)对白酒中挥发性酚类化合物进行了分析，该方法需要采用DI-SPME技术进行前处理过程，并且该方法只能检测白酒中的4-甲基苯酚。

4、2011年杨敏、寻思颖、冯永渝、彭黔荣、董睿、耿平兰、孙棣在《白酒中挥发性酚类化合物的高效液相色谱测定方法》中采用的方法是利用高效液相-荧光检测器对甲基苯酚类物质进行检测。此方法同样需要对样品进行前处理过程：取50～100mL酒样，用CH₂Cl₂或CHCl₃进行液液萃取，每次萃取剂的用量为酒样的体积百分比为20～30％vol，萃取3次，合并有机相形成萃取液，所得的萃取液于35℃0.075MPa条件下旋转蒸发浓缩，至不再有馏出液流出，浓缩液用1％冰醋酸定容至25或50mL，过0.45μm滤膜后，才能进行样品分析；并且液相流动相的配制也比较复杂：流动相A为冰醋酸/β-环糊精水溶液＝1/100；流动相B为冰醋酸/乙腈/β-环糊精水溶液＝1/40/60，β-环糊精水溶液β-环糊精浓度为：7.05×10^-3-8.81×10^-3mol/L；该方法整个液相色谱的分析时间也超过了40min，并且白酒样品的酒精度也需要调整到45-53度，操作较繁琐。

发明内容

针对上述方法检测甲基苯酚类化合物所存在的缺陷，本发明提供了一种检测白酒中甲基苯酚类物质含量的方法。该方法具有操作简单、耗时短、准确度高、重现性好等优点。

一种检测白酒中甲基苯酚类物质含量的方法，包括以下步骤：

a、用高效液相-三重四级杆质谱联用仪分别检测梯度浓度的2-甲基苯酚溶液、3-甲基苯酚溶液、4-甲基苯酚溶液，根据各浓度对应的质谱强度峰面积分别绘制得到2-甲基苯酚的浓度-峰面积标准曲线、3-甲基苯酚的浓度-峰面积标准曲线、4-甲基苯酚的浓度-峰面积标准曲线；

b、用甲醇水溶液稀释待测白酒，得待测样品；