[发明专利]堇叶紫金牛快速工厂化生产方法

权利要求书

1.堇叶紫金牛快速工厂化生产方法，其特征在于包括以下步骤：

1)选取堇叶紫金牛优良单株带腋芽茎段为外植体，先诱导休眠腋芽快速萌发，将腋芽茎段的芽向上接种到启动培养基上，启动培养基为：MS+0.15-0.30mg/L氯吡苯脲CPPU+0.10-0.20mg/L萘乙酸NAA+3％蔗糖+0.7％琼脂，pH为5.8-6.0；

2)诱导腋芽分化不定芽，启动培养20d以后，休眠的腋芽萌发，将新萌发的嫩芽切下来，接种到不定芽分化培养基上，所述的不定芽分化培养基为：MS+0.50-0.80mg/L氯吡苯脲CPPU+0.10-0.20mg/L萘乙酸NAA+3％蔗糖+0.7％琼脂，pH为5.8-6.0；

3)分化培养40d以后，腋芽分化产生大量不定芽，不定芽以芽丛的形式存在，将步骤2)得到的不定芽丛，拨散成单个不定芽，将单个不定芽接种到壮苗生根培养基上，培养20d以后，不定芽逐渐分化为健壮的再生小苗，同时基部产生少量愈伤组织，愈伤组织上部分化出少量不定根，所述的壮苗生根培养基为：MS+0.10-0.15mg/L氯吡苯脲CPPU+0.5-0.8mg/L吲哚丁酸IBA+0.5g/L活性炭+2％蔗糖+0.6％琼脂，pH为5.8-6.0；

4)对生根的组培苗进行炼苗移栽。

2.如权利要求1所述的堇叶紫金牛快速工厂化生产方法，其特征在于步骤1)中：选取无病虫害的堇叶紫金牛性状优良的单株，待新芽抽出后，剪取其中半木质化的嫩茎，将叶片沿叶柄基部切去，嫩茎切成小段，进行消毒，将消毒处理过的茎段切成2cm的小段，每段上有1个休眠的腋芽，用无菌刀片先将茎段最下端切口褐化的部分切去。

3.如权利要求1所述的堇叶紫金牛快速工厂化生产方法，其特征在于步骤1)中培养条件为：温度25±2℃，光照时间为10h/d，光照强度为1500-2000Lx，湿度为60％-65％。

4.如权利要求2所述的堇叶紫金牛快速工厂化生产方法，其特征在于步骤1)中的消毒是将嫩茎切成小段后先用0.5％的新洁尔灭+洗洁精混合溶液搅拌消毒处理1h，倒掉消毒液，在流水下冲洗1h，备用，超净工作台中，处理过备用的小段用无菌水冲洗一下，倒掉无菌水，用70％-75％的酒精溶液消毒60-90s，倒掉酒精后，再用0.1％的升汞溶液消毒5-10min，倒掉消毒液，最后用无菌水反复冲洗4-5次。

5.如权利要求1所述的堇叶紫金牛快速工厂化生产方法，其特征在于所述步骤3)中壮苗生根培养条件为：温度25±2℃，光照时间为8h/d，光照强度为1000Lx，湿度为60％-65％。

6.如权利要求1所述的堇叶紫金牛快速工厂化生产方法，其特征在于步骤4)中移栽前3-4d，将组培瓶的瓶盖松动，但不要完全打开，移栽前1-2d，将组培瓶的瓶盖完全打开，并往组培瓶内灌入少量的无菌水，生根组培苗移栽前，先用镊子将生根苗轻轻地从培养基内夹出来，将根部所带的培养基用清水完全清洗干净，将清洗好的生根苗以3-4株为一丛种入炼苗基质中，所述炼苗基质为松鳞，最后，用0.3％多菌灵溶液对移栽的生根苗和基质表面进行均匀喷施，以松鳞完全浸湿为宜，然后用塑料薄膜做成封闭的小拱棚，进行保温保湿40d左右。

7.一种堇叶紫金牛快速工厂化生产方法的壮苗生根培养基，其特征在于由以下成分组成：MS+0.10-0.15mg/L氯吡苯脲CPPU+0.5-0.8mg/L吲哚丁酸IBA+0.5g/L活性炭+2％蔗糖+0.6％琼脂，pH为5.8-6.0。