[发明专利]脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒

权利要求书

1.一种脂蛋白磷脂酶A2检测试剂盒，该试剂盒包括试剂R1、试剂R2，试剂R1包括缓冲液、稳定剂、电解质、表面活性剂和防腐剂；试剂R2包括偶联抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的聚苯乙烯胶乳颗粒、缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂。

2.根据权利要求1所述检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液包括但不限于PBS缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、柠檬酸-磷酸盐缓冲液、2-吗啉乙磺酸缓冲液、氯化铵缓冲液以及其他具有相似性质的缓冲液中的一种或者几种。

3.根据权利要求2所述检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为氯化铵缓冲液。

4.根据权利要求1所述检测试剂盒，其特征在于，所述电解质包括但不限于氯化钠、氯化钾、氯化钙以及其他具有类似性质的电解质中的一种或者几种；所述表面活性剂包括但不限于SPAN系列表面活性剂、TRITON系列表面活性剂、TWEEN系列表面活性剂以及其他具有类似性质的表面活性剂中的一种或者几种。

5.根据权利要求1所述检测试剂盒，其特征在于，所述R1试剂为含5g/LPEG8000（聚乙二醇8000），10g/L氯化钠，8g/L的蔗糖，5g/L的吐温20，1g/L叠氮钠的0.25M氯化铵缓冲液，pH值为9.0；所述R2试剂为中含有1g/L的偶联抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的聚苯乙烯胶乳颗粒，15g/L的蔗糖，2g/L的叠氮钠的0.1M氯化铵缓冲液；pH值为9.0。

6.根据权利要求1所述检测试剂盒，其特征在于，所述偶联抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的聚苯乙烯胶乳颗粒的制备步骤如下：

（1）聚苯乙烯胶乳颗粒的激活：在带有羧基的聚苯乙烯胶乳颗粒中加入乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺，混合均匀，反应结束后加入己二酸二酰肼，继续反应，得到激活的聚苯乙烯胶乳颗粒；

（2）抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的氧化：用高碘酸钠将抗脂蛋白磷脂酶A2抗体Fc端糖链上的羟基氧化成醛基；

（3）抗脂蛋白磷脂酶A2抗体与聚苯乙烯胶乳颗粒的偶联：将步骤（1）激活的聚苯乙烯胶乳颗粒和步骤（2）氧化的抗脂蛋白磷脂酶A2抗体混合进行反应，反应结束后，加入葡萄糖封闭聚苯乙烯胶乳颗粒上没有发生反应的集团，获得偶联抗脂蛋白磷脂酶A2抗体的聚苯乙烯胶乳颗粒。

7.根据权利要求6所述检测试剂盒，其特征在于，步骤（1）中乙基二甲基胺丙基碳化二亚胺：聚苯乙烯胶乳颗粒=0.1-1:100（重量）；己二酸二酰肼：聚苯乙烯胶乳颗粒=10-50:100（重量）；所述聚苯乙烯胶乳颗粒粒径介于100nm-300nm之间。

8.根据权利要求6所述检测试剂盒，其特征在于，步骤（2）中高碘酸钠:抗脂蛋白磷脂酶A2抗体=1:2（重量）。

9.根据权利要求6所述检测试剂盒，其特征在于，步骤（3）中抗脂蛋白磷脂酶A2抗体：激活的聚苯乙烯胶乳颗粒=5-20:100（重量），葡萄糖：激活的聚苯乙烯胶乳颗粒=20-50：100（重量）。