[发明专利]基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂的过氧化氢检测试剂盒

权利要求书

1.一种基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测方法，其特征是将过氧化氢，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，铋-牛血清白蛋白-纳米铂水溶液混合后恒温孵育，加入0.5 mol/L的硫酸终止反应，反应产物为黄色，最大吸收波长为450 nm；所述的铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶由以下步骤制得：在5 mL浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL 浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到铋-牛血清白蛋白-纳米铂的水溶液；将铋-牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到铋-牛血清白蛋白-纳米铂粉末。

2.根据权利要求1所述的基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测方法，其特征是能根据显色体系溶液颜色判断过氧化氢的浓度。

3.根据权利要求1所述的基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测方法，其特征是能根据酶标仪450 nm处的吸光度以检测过氧化氢的浓度。

4.根据权利要求1或3所述的基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测方法，其特征是检测线性范围为0.5~30 μmol/L，检测限为0.068 μmol/L。

5.根据权利要求1或2或3所述的基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测方法，其特征是在96孔板中加入100 μL过氧化氢溶液，10 μL浓度为8 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，10 μL浓度为4.76 mg/mL铋-牛血清白蛋白-纳米铂水溶液以及80 μL浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液，混合后在37℃恒温孵育15 min，加入50 μL浓度为 0.5 mol/L的硫酸终止反应，目视观察颜色的变化或通过酶标仪测定450nm波长处的吸光度。

6.根据权利要求1或2或3所述的基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测方法，其特征是可用于测定细胞外过氧化氢浓度。

7.一种基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测试剂盒，其特征是试剂盒中含有3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液、铋-牛血清白蛋白-纳米铂溶液、硫酸溶液和过氧化氢溶液，所述的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液作为a液，铋-牛血清白蛋白-纳米铂溶液作为b液，硫酸溶液作为终止液，过氧化氢溶液作为标准液。

8.根据权利要求7所述的基于铋-牛血清白蛋白-纳米铂模拟过氧化物酶的过氧化氢检测试剂盒，其特征是所述a液中含有浓度为8 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐水溶液；所述b液中含有用浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液配制成的浓度为0.53 mg/mL的铋-牛血清白蛋白-纳米铂溶液；所述终止液中含有浓度为0.5 mol/L的硫酸溶液；所述标准液中含有浓度为1，2，10，20，30，40，60 μmol/L的过氧化氢水溶液。