[发明专利]具有抗肿瘤活性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂NXGF和NXGH及其制备方法和应用

权利要求书

1.表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂或其可药用的盐，命名为NXGF或NXGH，其特征 在于所述的NXGF的分子结构式如式I所示，所述的NXGH的分子结构式如式II所示:

2.权利要求1所述的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂或其可药用的盐在制备促进 肿瘤细胞凋亡的药物中的用途。

3.如权利要求2所述的用途。其特征在于所述的促进肿瘤细胞凋亡是通过抑制表皮生 长因子受体酪氨酸激酶磷酸化而实现的。

4.如权利要求2或3所述的用途，其特征在于所述的肿瘤细胞为EGFR突变的非小细胞肺 癌细胞。

5.一种制备权利要求1所述的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂或其可药用的盐的 方法，包括：

(1)氮气保护下将60g2-氨基-4氯苯甲酸和315ml甲酰胺混合于160℃下反应10h，冷却 后倒入冰水中，抽滤，滤饼分别用水和甲醇洗涤，最后用乙醚和正己烷各洗涤一次，抽干得 到浅棕色固体，即化合物一；

(2)将38ml浓硫酸加入单颈瓶中，降温至0℃以下，滴加36ml浓硝酸，保持温度在5℃以 下，分批加入12.0g化合物一，加毕于95-100℃反应2-2.5h后冷却，倒入冰水中，抽滤，滤饼 分别用饱和碳酸氢钠溶液和水洗涤，旋干，用220ml醋酸重结晶一次，再用醋酸结晶一次，得 到黄色固体，即化合物二；

(3)将4.60g化合物二和7.80g甲醇钠的80mL甲醇溶液加入到密闭容器中，于100-105℃ 下反应18-20h，冷却，加入醋酸调pH至中性，旋去溶剂，加入水，抽滤，滤饼用甲醇洗涤，抽 干，滤饼用乙醇带干水分，抽干旋干得到产物，即化合物三；

(4)将4.00g化合物三，27.0g三氯氧磷，2.6g三乙胺，100ml二氯乙烷的混合物于95℃下 回流反应4-5h，冷却抽滤旋干，二氯甲烷溶解，冰水洗涤，干燥抽滤旋干，进行柱层析分离， 使用二氯甲烷：乙酸乙酯体积比＝16:1的混合溶液洗脱，得到产物，即化合物四；

(5)氮气保护下将2.5g化合物四，1.6g3-氯-4-氟苯胺，250ml异丙醇的混合物于100- 105℃回流反应3h，冷却抽滤，滤饼用少量异丙醇和乙醚洗涤，干燥得到黄色固体产物，即化 合物五；

(6)氮气保护下将3.0g化合物五溶于45mlDMF中于150℃分批投入2.0g氯化锂，共反应 3h，冷却，倒入冰水中，抽滤，旋干，进行柱层析分离，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比＝30: 1、20:1以及10：1的混合溶液进行洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比＝10：1的洗脱液中得到黄 色固体，即化合物六；

(7)20.0g三缩四乙二醇和10.2g三乙胺加入反应瓶中，加入300ml乙腈，冰浴降温至0-5 ℃，将19.0gTsCl溶入100ml乙腈缓慢滴入该溶液中，1h滴完，滴完后升至20-25℃反应12- 14h，旋去溶剂，进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝4:1以及1.5:1的混合 溶液进行洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比＝4:1的洗脱液中得到油状产品，即化合物十八， 于正己烷：乙酸乙酯体积比＝1.5:1的洗脱液中得到油状物，即化合物十九；

(8)氮气保护下将12.0g化合物十八和2.4g咪唑，1.0g4-二甲氨基吡啶(DMAP)溶于 100ml的二氯甲烷中，体系冷却至0-5℃，滴加含有11.4g叔丁基二苯基氯硅烷(TBDPSCl)的 20mL的二氯甲烷溶液，加毕继续于0-5℃下反应1-1.5h，倒入水中，分层，水层用二氯甲烷萃 取，干燥浓缩后进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝8:1、6:1以及4:1的混 合溶液进行洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比＝4：1的洗脱液中得到油状产品，即化合物二 十一；

(9)氮气保护下将2.9g化合物六，12.2g碳酸钾，100mlDMF的混合物于90℃下滴加含有 6.18g化合物二十一的60ml二甲基甲酰胺溶液(DMF)，1h滴完，反应2h，旋干DMF，加入氯化铵 溶液，乙酸乙酯萃取旋干，进行柱层析分离，使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝1:2的混合溶液 洗脱2-3遍，得到黄色固体，即化合物八；

NXGF的制备：

(10)氮气保护下将0.85g化合物八，5.3g铁粉，0.28g氯化铵，5ml水，30ml乙醇的混合物 于95℃反应1.5-2h，冷却，抽滤，滤饼用二氯甲烷和甲醇泡洗，旋干，进行柱层析分离，依次 使用二氯甲烷：甲醇体积比＝60:1、40:1以及20:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷： 甲醇体积比＝20:1的洗脱液中得到黄色油状物，即化合物十四；

(11)氮气保护下将10g巴豆酸，23gN-溴代丁二酰亚胺(NBS)，160ml苯混合加热回流80 ℃分批加入570mgAIBN，回流搅拌4h，冷却至0℃搅拌20-30min，抽滤，滤饼用甲苯洗涤，滤 液旋干，用正己烷30ml回流提取，结晶三次后得到白色针状晶体，即化合物十七；

(12)氮气保护下将0.89g化合物十七溶入5ml二氯甲烷中冷却至0-5℃加入2滴DMF，滴 加0.76g草酰氯，保温反应10min，然后于20℃下反应2h，另取一三颈瓶，氮气保护下将0.74g 化合物十四，1.25g三乙胺，10ml二氯甲烷混合冷却至0℃，滴加入上述反应好的酰氯溶液 中，缓慢滴加控温为0-5℃，滴加完毕反应30min，加入饱和氯化铵溶液中，用二氯甲烷萃取， 干燥后旋干后进行柱层析分离，使用二氯甲烷：甲醇体积比＝40:1以及30:1的混合溶液进 行梯度洗脱，得到油状产品，即化合物十五；

(13)氮气保护下将0.35g化合物十五溶入8ml四氢呋喃中，冷却至0-5℃，加入12ml二甲 胺的四氢呋喃溶液于0-5℃下反应0.5h，加入饱和碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取，干燥抽滤 旋干后进行柱层析分离，使用含有0.5％三乙胺的二氯甲烷：甲醇体积比＝60:1的混合溶液 进行洗脱，得到产品，即化合物十六，即为EGFRTKI—NXGF化合物；

NXGH的制备：

(14)氮气保护下将1.80g化合物八，9.20g铁粉，1.20g氯化铵，1.4ml水，20ml乙醇混合 均匀，95℃回流反应2h，冷却，抽滤，滤饼用二氯甲烷和甲醇泡洗，旋干母液，氮气加压下进 行柱层析分离，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比＝60:1、40:1以及20:1的混合溶液进行梯度 洗脱，得到黄色油状物，即化合物九；

(15)氮气保护下将10g巴豆酸，23gNBS，160ml苯的混合物于80℃下回流反应1.5-2h， 分批加入570mg偶氮二异丁腈(AIBN)，回流搅拌4h，冷却至0℃搅拌20-30min，抽滤，滤饼用 甲苯洗涤，滤液旋干，用正己烷30ml回流提取，结晶三次后得到白色针状晶体，即化合物十 七；

(16)氮气保护下将0.84g化合物十七溶入6ml二氯甲烷中冷却至0-5℃加入2滴DMF，滴 加0.72g草酰氯，保温反应10min，于20℃下反应2h，另取一三颈瓶，氮气保护下将1.57g化合 物九，1.76g三乙胺，10ml二氯甲烷的混合物冷却至0℃，滴加入上述反应好的酰氯溶液，缓 慢滴加控温0-5℃，滴加完毕于0-5℃反应30min，加入饱和氯化铵溶液，用二氯甲烷萃取，干 燥抽滤旋干，进行柱层析分离，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比＝60：1以及40：1的混合溶液 进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比＝40：1的洗脱液中得到油状产品，即化合物十；

(17)氮气保护下将1.10g化合物十溶入15ml四氢呋喃中，冷却至0-5℃，加入24ml二甲 胺的四氢呋喃溶液于0-5℃下反应0.5h，加入饱和碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取，干燥抽滤 旋干，进行柱层析分离，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比＝40:1、30：1、20：1以及10：1的混合 溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比＝10：1的洗脱液中得到黄色油状产品，缓慢变 成固体，即化合物十一；

(18)氮气保护下将0.77g化合物十一溶入8ml四氢呋喃中，然后加入含有0.38g四丁基 氟化铵的三水合物的4ml四氢呋喃溶液，于25℃搅拌反应2.5h，旋干进行柱层析分离，依次 使用二氯甲烷：甲醇体积比＝40:1、30:1以及20:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷： 甲醇体积比＝20:1的洗脱液中得到米白色固体，即化合物十二，即为EGFRTKI—NXGH化合 物。