[发明专利]禽结核高免血清及其制备方法有效
| 申请号： | 201610053878.0 | 申请日： | 2016-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN105504054B | 公开（公告）日： | 2020-09-01 |
| 发明（设计）人： | 朱德康;陈泓汐;程安春;汪铭书;宋晓恒 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/12 | 分类号： | C07K16/12;C07K16/06 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 结核 血清 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.禽结核高免血清的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
A、免疫抗原的制备
a）将禽结核杆菌装入50ml离心管中，8000g离心15min，巴氏吸管吸弃上清液；
b）加入灭菌后的PBS缓冲液，9000g离心15min，巴氏吸管吸弃上清液；
c）加入灭菌后的PBS缓冲液，10000g离心15min，巴氏吸管吸弃上清液；
d）加入质量分数0.3%的甲醛溶液，37℃培养箱放置24h，再室温下放置24h；10000g离心15min，巴氏吸管吸弃上清液；
e）加入30ml灭菌后的PBS缓冲液，10000g离心15min，巴氏吸管吸弃上清液，重复操作至甲醛被洗净；
f）加入灭菌后的PBS缓冲液制成OD600为0.5的悬浮液即可；
B、动物免疫
选取2-3月龄健康雄性新西兰兔，采用耳缘静脉注射法进行免疫，免疫程序具体为：
；
C、采血及血清收集
最后一次免疫结束7天后采取颈动脉放血，血液37℃培养箱放置1h后，再4℃冰箱放置12h，离心收集血清，血清分装后置于-80℃保存。
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