[发明专利]一种长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法

权利要求书

1.一种长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征在于，所述方法 中主要包括以下步骤：

步骤1、以长筒石蒜的种子胚或花朵为材料诱导出愈伤组织；

步骤2、将愈伤组织顺次进行不定芽诱导培养以及生根诱导培养，即得 到长筒石蒜再生植株。

2.如权利要求1所述的长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征 在于，步骤1中，诱导愈伤组织所用培养基为愈伤组织诱导培养基，所述愈 伤组织诱导培养基主要成分为：MS+2，4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L。

3.如权利要求2所述的长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征 在于，所述愈伤组织诱导培养基蔗糖浓度为30-38g/L、琼脂6.9-7.5g/L，pH 值为5.5-6.0。

4.如权利要求3所述的长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征 在于，所述愈伤组织诱导培养基蔗糖浓度为35g/L、琼脂7.1g/L，pH值为5.8。

5.如权利要求3所述的长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征 在于，以长筒石蒜的种子胚为材料诱导愈伤组织，具体的操作方法包括以下 步骤：

步骤1.1.1、种子无菌材料的制备，将长筒石蒜种子顺次进行以下操作： 流水冲洗1-2h；用质量浓度为73-78％乙醇溶液浸泡1-3min；无菌双蒸水冲 洗2-5次，每次10-30s；质量浓度为0.08-0.3％的HgCl₂浸泡10-20min；无菌 双蒸水清洗2-5次，得种子无菌材料；

步骤1.1.2无菌操作取出所述种子无菌材料中的完整种胚，即得种子胚；

步骤1.1.3将所述种子胚接种于所述愈伤组织诱导培养基上；

步骤1.1.4进行暗培养，培养温度25±1℃，培养时间5-25d，即得所述 愈伤组织。

6.如权利要求3所述的长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征 在于，以长筒石蒜的花朵为材料诱导愈伤组织；具体的操作方法包括以下步 骤：

步骤1.2.1、花朵无菌材料的制备，将长筒石蒜花朵顺次进行以下操作： 流水冲洗1-2h；取花朵的花被片、花丝或花茎，并切成4-6mm×4-6mm的小 块，用质量浓度为73-78％乙醇溶液浸泡1-3min；无菌双蒸水冲洗2-5次，每 次10-30s；质量浓度为0.08-0.3％的HgCl₂浸泡10-20min；无菌双蒸水清洗2-5 次，得花朵无菌材料；

步骤1.2.2将所述花朵无菌材料接种于所述愈伤组织诱导培养基上；

步骤1.2.3进行暗培养，培养温度25±1℃，培养时间5-25d，即得所述 愈伤组织。

7.如权利要求1所述的长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征 在于，步骤2中诱导不定芽采用不定芽诱导培养基，所述不定芽诱导培养基 的主要成分为：MS+2，4-D1.0mg/L+6-BA1.0mg/L；

不定芽诱导培养的温度为25±1℃，自然光照培养，培养时间5-25天。

8.如权利要求1所述的长筒石蒜组织培养得到再生植株的方法，其特征 在于，步骤2中生根诱导采用生根诱导培养基，所述生根诱导培养基的主要 成分为：MS+NAA0.2mg/L；

生根诱导不定芽诱导培养的温度为25±1℃，自然光照培养，培养时间 5-25天。