[发明专利]一种紫茎泽兰有机肥固体菌剂、制备方法及在有机肥生产中的应用有效
申请号: | 201610051346.3 | 申请日: | 2016-01-26 |
公开(公告)号: | CN105624062B | 公开(公告)日: | 2020-01-24 |
发明(设计)人: | 袁玲;黄建国;杜如万;徐明康;吴叶宽;王勇;杨水平 | 申请(专利权)人: | 西南大学;四川省烟草公司凉山州公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C05G3/00;C05F17/00;C12R1/39;C12R1/01 |
代理公司: | 50215 重庆辉腾律师事务所 | 代理人: | 王海军 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 泽兰 有机肥 固体 制备 方法 生产 中的 应用 | ||
1.一种紫茎泽兰有机肥固体菌剂,其特征在于:所述紫茎泽兰有机肥固体菌剂由荧光假单胞杆菌的三级菌种和纤维单胞菌的三级菌种混合制成;
所述荧光假单胞杆菌的三级菌种的制备方法为:
一级菌种菌液:配制固体培养基,约取5毫升置于体积为20毫升的试管中,在121℃、1.5个大气压,灭菌30min,摆放斜面,冷却后接种荧光假单胞杆菌,35℃暗培养4天;无菌水洗涤培养基表面的菌落,稀释至104个细菌/毫升备用;
二级菌种菌液:配制液体培养基,至于发酵罐中,在121℃、1.5个大气压,灭菌30min,冷却后接入500毫升一级菌种的菌液;在35℃,每min每升10毫升的通气量,每min60转搅拌速率的条件下暗培养4天,活菌数超过109个/毫升;
三级固体菌种:取粒径0.3±0.2mm的谷糠粉、水、风干的粒径0.3±0.2mm紫茎泽兰粉末、尿素、荧光假单胞杆菌二级菌种的菌液按100:70:5:1.5:1.0的质量比混合均匀,堆成长/宽/高分别为2-4m、1.3-1.5m、1.3-1.5m的形状,覆盖塑料薄膜,每7天翻堆1次,堆置28天即可制备出固体菌剂;
所述纤维单胞菌的三级菌种的制备方法为:
一级菌种菌液:配制固体培养基,约取5毫升置于体积为20毫升试管中,在121℃、1.5个大气压,灭菌30min,摆放斜面,冷却后接种纤维单胞菌,45℃暗培养4天;无菌水洗涤培养基表面的菌落,稀释至104个细菌/毫升备用;
二级菌种菌液:配制液体培养基,至于发酵罐中,在121℃、1.5个大气压,灭菌30min,冷却后取500毫升一级菌种的菌液,在45℃,每min每升10毫升的通气量,每min60转搅拌速率的条件下暗培养4天,活菌数达到109个/毫升以上;
三级固体菌种:取粒径0.3±0.2mm的小麦或玉米秸秆粉、水、尿素、纤维单胞菌二级菌种的菌液按100:70:1.0:1.0的质量比混合均匀,堆成长/宽/高为1.2m-1.5m、1.0m-1.5m、3m-4m的形状,覆盖塑料薄膜,每7天翻堆1次,堆置28天即可制备固体菌剂。
2.根据权利要求1所述的紫茎泽兰有机肥固体菌剂,其特征在于:所述荧光假单胞杆菌一级菌种的固体培养基的配方为:取牛肉膏0.3克,玉米淀粉1.0克,风干磨细过0.1毫米筛的紫茎泽兰粉末2.0克,氯化钠0.5克,琼脂1.5克,水1000毫升,pH值7.0-7.2制备得到;
所述荧光假单胞杆菌二级菌种的液体培养基的配方为:取牛肉膏30克,葡萄糖100克,200克风干磨细过0.1毫米筛的紫茎泽兰粉末,氯化钠50克,水100升,pH 7.0-7.2。
3.根据权利要求1所述的紫茎泽兰有机肥固体菌剂,其特征在于:所述纤维单胞菌一级菌种的固体培养基的制备方法为:取牛肉膏0.3克,粉碎过0.1毫米筛的滤纸粉末1.0克,氯化钠0.5克,琼脂1.5克,水1000毫升,pH 7.0-7.2制备得到;
所述纤维单胞菌二级菌种的液体培养基的制备方法为:取牛肉膏30克,粉碎过0.1毫米筛的滤纸粉末1000克,氯化钠50克,水100升,pH 7.0-7.2制备得到。
4.根据权利要求1所述的紫茎泽兰有机肥固体菌剂,其特征在于:所述荧光假单胞杆菌的三级菌种和纤维单胞菌的三级菌种的质量比为3:1。
5.根据权利要求1-4任一项所述的紫茎泽兰有机肥固体菌剂在制备紫茎泽兰有机肥中的应用。
6.紫茎泽兰有机肥的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)在紫茎泽兰生物量最大的时期,收割植物体;
2)选择平坦的地块,将鲜品紫茎泽兰平行于地面整齐堆放,每堆置30-50cm厚,分别撒权利要求1-4任一项所述紫茎泽兰有机肥固体菌剂、尿素及石膏,踩踏紧实,堆至高度1-1.5m,覆盖农用塑料薄膜,每堆1000-1500kg;堆放60-90天至紫茎泽兰均呈黑褐色,轻轻敲击成碎屑或粉末状得到紫茎泽兰有机肥。
7.根据权利要求6所述的紫茎泽兰有机肥的制备方法,其特征在于:所述紫茎泽兰、紫茎泽兰有机肥固体菌剂、尿素和石膏的质量比为250:1:1:1。
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