[发明专利]一种双相体系促进微生物合成2-羟基-3-苯基丙酸的方法在审
| 申请号： | 201610051073.2 | 申请日： | 2016-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN105567747A | 公开（公告）日： | 2016-05-11 |
| 发明（设计）人： | 朱益波;郑青云;孙亚男;徐艳;王立梅;齐斌 | 申请（专利权）人： | 常熟理工学院 |
| 主分类号： | C12P7/42 | 分类号： | C12P7/42 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 范晴 |
| 地址： | 215500 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 体系 促进 微生物 合成 羟基 苯基 丙酸 方法 | ||
1.一种双相体系促进微生物合成2-羟基-3-苯基丙酸的方法，包括如下步 骤：
(1)选择有机溶剂，配制水/有机溶剂双相体系；
(2)活化菌体细胞，收集菌体用缓冲液洗涤后，悬浮在上述的水/有机溶 剂双相体系，并加入底物苯丙酮酸钠和葡萄糖，进行全细胞转化；
(3)在发酵罐中通过间歇补加底物于水/有机溶剂双相体系进行全细胞转 化PLA。
2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述的菌体细胞选自大 肠杆菌细胞、芽孢杆菌、乳酸菌。
3.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有 机溶剂选自甲苯、乙酸乙酯、醇类、不饱和脂肪酸、液态烷烃或其取代衍生物。
4.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有 机溶剂选自环己烷、己烷、辛烷、三氯甲烷、油酸、异戊醇。
5.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有机 溶剂正辛烷。
6.根据权利要求1-5任一项所述的合成方法，其特征在于，步骤(1)中， 所述水/有机溶剂双相体系中，水相与有机相的体积比为1.5-1:1。
7.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，水/有机 溶剂双相体系中含有磷酸盐缓冲液；且pH为7.0。
8.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述转化 过程的温度为30-45℃。
9.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，在步骤(2)的转化过程 中，分批补加大肠杆菌菌体、底物苯丙酮酸钠和葡萄糖生产PLA。
10.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，所述的大肠杆菌细胞为 E.coliBL21-pET-28a-D-LDHY52V；制备得到(R)-2-羟基-3-苯基丙酸。
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