[发明专利]一种当归抗肿瘤药物

权利要求书

1.一种具有抗肿瘤作用的当归提取物，其特征在于，该当归提取物是采用如下方法制备的：

（1）将当归粉碎，置烘箱内45℃烘干4h后，加20倍量60%丙酮，于65℃水浴回流提取3次，每次75min，合并提取液，回收丙酮，得到当归总提取物浸膏；

（2）将得到的当归总提取物浸膏以氯仿:甲醇=50:2的混合溶液在45℃水浴条件下搅拌溶解，过滤，滤液在45℃水浴中减压浓缩后进行层析分离；

（3）选用AB-8型大孔吸附树脂进行柱层析分离，树脂柱径高比为1:8，上样体积7BV，水洗5BV除杂，以乙酸乙酯:丙酮=100:2的洗脱剂8BV洗脱，流速为3BV/h，收集洗脱液，洗脱液浓缩，干燥，即得。

2.如权利要求1所述的当归提取物的含量测定方法，其特征在于，采用高效液相色谱法对6-甲氧基-7-羟基香豆素进行含量测定：

（1）色谱条件：采用HypersilDs色谱柱；流动相：比例为30：70的乙腈-水；检测波长：200nm；柱温：20℃；流速：1.0mL·min^-1；进样量：10μL；

（2）对照品溶液制备：精密称取80℃干燥至恒重的6-甲氧基-7-羟基香豆素对照品适量，加甲醇溶解制成每1mL含0.2mg的对照品溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密称取本发明当归提取物10mL，加甲醇40mL，加热回流4h，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10mL溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次15mL，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。

3.一种如权利要求1所述的当归提取物的含量测定方法，其特征在于，采用气相色谱法对香草醛、马鞭草烯酮进行含量测定：

（1）色谱条件：色谱柱：ZB-WAX弹性石英毛细管柱；载气：N₂，0.5～1.5mL·min^-1；氢气，30～50mL·min^-1；空气，300～500mL·min^-1；分流比：5～15：1；进样口温度：240～260℃，检测器温度：290～310℃；程序升温：初始80℃，每分钟5℃升至120℃，每分钟10℃升至180℃，保持3.5min；内标法；

（2）内标溶液的制备：取环己酮适量，加无水乙醇溶解并稀释制成溶液，摇匀，作为内标溶液；

（3）供试品溶液的制备：精密量取本品，置容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，再精密量取，置容量瓶中，精密加入内标溶液，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；

（4）对照品溶液的制备：精密称取香草醛对照品、马鞭草烯酮对照品适量，加无水乙醇溶解并稀释制成含香草醛及马鞭草烯酮的对照品储备溶液，备用；

（5）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各5～20μL，注入气相色谱仪，进行检测。