[发明专利]一种止痛贴剂的指纹图谱及其质量检测方法

权利要求书

1.一种应用高效液相指纹图谱测定消肿止痛贴剂有效成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备

称取圣草酚-7-甲醚、异樱花素对照品，加乙醇制得混合对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备

取消肿止痛贴的药贴，粉碎，过筛，加入乙醇溶液，提取20-50min，放至室温，加入乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，蒸干，残渣加入乙醇溶解，摇匀即得供试品溶液；

(3)测定法：

吸取混合对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，得到色谱图，

其中，所述高效液相色谱仪的色谱条件如下：

色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱，

流动相：乙腈-0.2％甲酸为流动相，进行梯度洗脱，梯度程序如下表

流动相的流速为0.8-1.2ml/min，柱温30-40℃，

检测波长：290±3nm；建立指纹图谱，其中圣草酚-7-甲醚和异樱花素峰分离度大于1.5，检测有效成分含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，步骤(1)中混合对照品溶液中圣草酚-7-甲醚和异樱花素的浓度分别为40μg/ml和20μg/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，乙醇的浓度为55～85％。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，乙醇的浓度为80％。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述药贴经粉碎、过筛后加入乙醇，使得每100ml提取溶剂中所含药粉为1g～5g。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中提取方法为超声提取或加热回流提取。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中提取方法为超声提取25～35min。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，超声功率为500W，频率为40kHz。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，柱温为35℃。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相的流速为1ml/min。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，检测波长为290nm。

12.一种消肿止痛贴剂高效液相指纹图谱的建立方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备

称取圣草酚-7-甲醚、异樱花素对照品，加入浓度为55～85％的乙醇制得混合对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备

取消肿止痛贴的药贴，粉碎，过筛，加入浓度为55～85％的乙醇溶液，使得每100ml提取溶剂中所含药粉为1g～5g，超声提取或加热回流提取20-50min，放至室温，加入浓度为55～85％的乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，蒸干，残渣加入浓度为55～85％的乙醇溶解，摇匀即得供试品溶液；

(3)获得色谱图

以对照品溶液作为参照物，将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，

其中，所述高效液相色谱仪的色谱条件如下：

色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，

流动相：乙腈-0.2％甲酸为流动相，进行梯度洗脱，梯度程序如下：

流动相的流速为0.8-1.2ml/min，柱温30-40℃，

检测波长：290±3nm；

(4)生成对照指纹图谱：

选择合格的多批消肿止痛贴剂的指纹图谱，以圣草酚-7-甲醚为参比峰，得到11个共有峰的图谱，按中位数法计算生成标准对照指纹图谱，其中，指纹图谱相对保留时间为：

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，乙醇的浓度为80％。

14.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱。