[发明专利]一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性的方法及其应用

权利要求书

1.一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、制备琼胶寡糖：将江蓠清洗除杂，烘干，加入江蓠重量30倍的水使江蓠充分溶胀，80℃水浴2h；然后升温至121℃，加热20min；将江蓠趁热挤胶，用滤布包裹江蓠，并利用压力机挤压，收集挤胶滤出的多糖溶液，冷却、烘干、粉碎成颗粒，即得江蓠粗多糖；将江蓠粗多糖配制成5g/L的溶液，加入琼胶酶处理；加酶量为15％(v/v)，酶活为200U/mL；酶解20-1280min，以制备寡糖溶液，冷冻干燥，或真空干燥成固体粉末，制得聚合度为3-8的琼胶寡糖；

步骤二、菌种培养：制备MRS培养基，琼胶寡糖作为碳源，接种嗜热链球菌OD₆₀₀值为0.8的菌液，接种量为2％，无氧环境下，42℃，静置培养2-3天；

步骤三、液体菌保藏：在0D₆₀₀值为1.2嗜热链球菌液体中，添加浓度为3g/L且聚合度为3的琼胶寡糖，放置4℃下贮藏；

步骤四、固体菌剂保藏：在0D600值为1.2嗜热链球菌液体中，添加浓度为3g/L且聚合度为3的琼胶寡糖，喷雾干燥制备固体菌剂，喷雾干燥条件为：麦芽糊精添加量25％，进风温度130℃，进风速度4m³/min，进料速度700mL/h，空气压力0.3Pa，制备固体菌剂，制备好的固体菌剂放置在常温或-20℃贮藏。

2.如权利要求1所述的一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性的方法，其特征在于：所述步骤一中，酶解时间为20min，制得聚合度为8的琼胶寡糖。

3.如权利要求1所述的一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性的方法，其特征在于：所述步骤一中，酶解时间为80min，制得聚合度为5的琼胶寡糖。

4.如权利要求1所述的一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性的方法，其特征在于：所述步骤一中，酶解时间为1280min，制得聚合度为3的琼胶寡糖。

5.如权利要求1所述的一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性的方法，其特征在于：所述步骤二中，MRS培养基的组成为：牛肉蛋白粉10g、鱼肉汁10g，酵母浸出汁粉5g，琼胶寡糖20g，醋酸钠5g，柠檬酸二铵2g，吐温800.1g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.28g，蒸馏 水1000ml；121℃高压灭菌15min，调节pH6.2-6.4。

6.一种如权利要求1所述的提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性方法的应用，其特征在于：用于模拟胃肠消化对嗜热链球菌的作用：将发酵一定程度的嗜热链球菌添加琼胶寡糖放置于体外模拟人体肠液或模拟人体胃液中，测定嗜热链球菌的耐受性。

7.如权利要求6所述的一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性方法的应用，其特征在于：所述体外模拟人体肠液条件为：KH₂PO₄0.5％，胰蛋白酶0.3％，用NaOH调节pH为8.0,0.22μm微孔滤膜过滤灭菌。

8.如权利要求6所述的一种提高嗜热链球菌活性及消化道耐受性方法的应用，其特征在于：所述体外模拟人体胃液条件为：NaCl 0.3％，KCl 0.2％,胃蛋白酶0.5％，用HCl调节pH为2.0,0.22μm微孔滤膜过滤灭菌。