[发明专利]核素标记mAb109单抗药物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及核医学领域，具体地说，涉及一种核素标记mAb109 单抗药物及其制备方法。

背景技术

恶性肿瘤已成为威胁人类生命健康的最重要因素。肿瘤的发生与 周围环境有密不可分的关系，在有氧条件下，电离辐射/生物体的代 谢反应都会使细胞中的水分子发生电离后，产生大量活性氧族 (ReactiveOxygenSpecies，ROS)，包括H₂O₂、超氧阴离子等。活性氧 族在体内积累可以作用于细胞核DNA，破坏生物大分子，使脂质过氧 化、蛋白质和核酸的氧化、DNA双键断裂等，进而产生严重的生物学 效应，以至于促进肿瘤的发生。为了更好地适应环境，生物体在进化 过程中发展形成各种抗氧化系统，包括过氧化物酶(Cat)、超氧化物歧 化酶(SOD)以及过氧化物还原酶(Peroxire-doxin，Prxs)等。Prxs蛋白是 新近发现的一类过氧化物酶，属于抗氧化蛋白超家族，广泛存在于原 核生物和真核生物中，其催化活性和蛋白序列与其他抗氧化剂完全不 同。大量的研究表明，Prxs蛋白具有多种生物学功能：它通过硫氧还 蛋白还原过氧化物和超氧化物，具有强大的抗氧化和清除自由基的作 用。此外Prxs还具有参与细胞增殖、分化，增强自然杀伤细胞(natural killercell，NK)细胞活性，保护自由基敏感蛋白，调节细胞内过氧化 氢浓度参与细胞信号转导及调控细胞凋亡等功能。前期已通过杂交瘤 技术制备出对Prxs具有靶向性的单克隆抗体mAb109，并针对该抗体 的抗原性质进行了长时间的深入研究。通过生物质谱分析，可以基本 确定该抗体针对的抗原为PrxI型硫氧过氧化物酶，通过免疫组化分析 证实了该抗原主要表达在肿瘤细胞的细胞膜和细胞质中。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型的核素标记mAb109单抗药物。

本发明的另一目的是提供所述单抗药物的制备方法。

为了实现本发明目的，本发明提供的核素标记mAb109单抗药物， 所述单抗药物是将单克隆抗体mAb109与双功能螯合剂 NCS-Bz-DOTA或NCS-Bz-NOTA偶联后进行放射性核素标记得到的 药物；其中所述放射性核素包括所有能与DOTA或NOTA结构配位的 放射性金属核素，比如正电子诊断核素和负电子治疗核素。所述正电 子诊断核素包括⁶⁴Cu、⁶⁸Ga、⁸⁹Zr等中的至少一种，所述负电子治疗 核素包括⁹⁰Y和/或¹⁷⁷Lu等。

本发明还提供所述单抗药物在制备PET/CT分子诊断显像剂中的 应用。

本发明还提供所述单抗药物在制备肿瘤靶向药物中的应用。

本发明的核素标记mAb109单抗药物的制备方法，包括以下步骤：

1)向浓度为2-5mg/ml的mAb109单抗溶液中加入相当于单抗2-10 倍(优选3倍)摩尔当量的NCS-Bz-DOTA或NCS-Bz-NOTA，用去离 子化处理的0.1M碳酸氢钠溶液调节反应体系的pH值至8.0-9.0，在 4-37℃(优选4℃)条件下反应4-24h(优选24h)，得到标记前体 DOTA-mAb109或NOTA-mAb109；

2)当放射性核素为正电子诊断核素时，向10-50μg标记前体中加 入400-740MBq新鲜配制的⁶⁴Cu、⁶⁸Ga或⁸⁹Zr淋洗液，然后用0.1M醋酸 钠溶液调至pH4.0-5.5，22℃-90℃反应10-50min，反应结束后，反应 液经PD-10柱分离纯化，即得；

3)当放射性核素为负电子治疗核素时，向10-50μg标记前体中依 次加入0.1MpH5.5的醋酸钠溶液0.2-1.0mL，400-4000MBq新鲜配制 的⁹⁰Y或¹⁷⁷Lu淋洗液，22℃-90℃反应10-50min，反应结束后，反应液 经PD-10柱分离纯化，即得。

前述的方法，步骤1)中用去离子化处理的，0.01MpH7.4的磷酸 盐缓冲液配制mAb109单抗溶液。

前述的方法，所得单抗药物经Radio-HPLC分析，放化纯度>98％。