[发明专利]一种万古霉素培养基及制备万古霉素的方法

权利要求书

1.一种万古霉素培养基，其特征是：包括如下重量份数的组分：

碳源 1.5-5份

氮源 0.05-0.15份

无机盐 0.15-0.45份

水 90-110份

所述无机盐包括硫酸镍、硝酸铁和氯化钠，按照重量份，硫酸镍：硝酸铁：氯化钠=0.5-2:0.5-2:1；

还包括重量份为0.04-0.06份的pH调节剂，所述pH调节剂包括磷酸二氢钠和磷酸氢二钠，按照摩尔比，磷酸二氢钠：磷酸氢二钠=0.15-0.19：1；

所述氮源由尿素、棉籽饼粉和乙酸铵混合而成，按照重量份，尿素：棉籽饼粉：乙酸铵=3-5:1:2-4；

还包括甘氨酸、色氨酸、酪氨酸组成的重量份为0.05-0.1份的氨基酸复合物，按照重量份，甘氨酸：色氨酸：酪氨酸=3-8：1:3-5。

2.根据权利要求1所述的万古霉素培养基，其特征是：所述碳源选自可溶性淀粉、葡萄糖、麦芽糖中的一种。

3.一种应用如权利要求1所述的万古霉素培养基的万古霉素制备方法，其特征是：包括如下步骤：摇瓶种子接种、种子罐万古霉素培养基培养、发酵罐万古霉素培养基培养、预发酵液预处理、陶瓷膜过滤、一次纳滤、草酸沉淀、一次板框过滤、一次过柱纯化、二次纳滤、一次结晶、二次板框过滤、活性炭脱色、脱色板框过滤、二次过柱纯化、超滤、三次纳滤、二次结晶、真空抽滤、晶体溶解、冷冻干燥、打粉包装，其中

①发酵液的预处理：按照发酵液体积的0.1-0.5%往万古霉素发酵液加入质量分数为10-20%的盐酸进行成盐，搅拌30min得到预处理液；

②草酸沉淀：将一次纳滤得到的浓缩液加入草酸沉淀罐，再加入一次纳滤得到的浓缩液重量的0.001-0.004%的固体草酸钠，搅拌30-50min后静置；

③活性炭脱色：将二次板框过滤得到的一次结晶体加入活性炭脱色罐，加入去离子水溶解，搅拌并加热，待一次结晶体的溶液沸腾时加入一次结晶体重量的3-6%的活性炭进行脱色30min。

4.根据权利要求3所述的万古霉素制备方法，其特征是：所述板框过滤中，过滤介质为滤板，所述滤板上预涂有2mm的助滤剂，所述助滤剂为活性炭。

5.根据权利要求3所述的万古霉素制备方法，其特征是：所述一次结晶和二次结晶过程中均加入晶体重量10倍的有机溶剂进行结晶，所述有机溶剂选用乙醇、丙酮和乙醚中的其中一种，所述一次结晶和二次结晶的起始温度为35-45℃，终点温度为0-15℃，降温速度为1-3℃/min。

6.根据权利要求3所述的万古霉素制备方法，其特征是：所述晶体溶解步骤为：将真空抽滤得到的二次结晶体加入溶解罐中，加入二次结晶体重量8-12倍的去离子水，搅拌30min至二次结晶体完全溶解形成溶解液。

7.根据权利要求3所述的万古霉素制备方法，其特征是：所述一次过柱纯化采用SP825树脂，所述二次过柱纯化采用HP20SS树脂。