[发明专利]一种香豆素二聚体及其制备方法和应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种香豆素二聚体及其制备方法和应用。

(二)背景技术

蜡梅在我国已有1000多年的栽培历史，作为一种香花植物，其叶和花具有挥发性的芳香油，香气怡人，常作为花卉盆景和鲜切花来观赏，因此是我国著名观赏植物之一。作为观赏植物，蜡梅不仅可以在公园、花地等地方孤植或者丛植，也可以栽培在建筑物前、草坪中或者道路两旁，还可作为盆景，栽培于室内。

蜡梅属植物除了观赏价值外还具有药用价值。《贵阳民间药草》中记载，显示蜡梅花可冲泡为茶，作为一种治疗咳嗽的药茶，因此蜡梅也是一种中药材，广泛被人们利用，在苏南民间就是用蜡梅花来治疗感冒咳嗽。蜡梅不仅可治疗感冒咳嗽，还可以治疗因风寒引起的腹痛、腹胀、消化不良，也可以治疗伤食引起的胃炎、胃痛、泛酸。

柳叶蜡梅(学名：Chimonanthus salicifolius S.Y.Hu)又名山蜡梅、亮叶蜡梅、毛山茶、岩马桑、香风茶、石凉茶等，为蜡梅科蜡梅属常绿灌木，是中国特有的属、种，主要产于安徽、江西、浙江。柳叶蜡梅也被应用于医药研究，表明其具有抗病毒、止咳化痰、抗菌等疗效。其提取物对人宫颈癌HELA和人胃癌SGC-7901的生长有抑制作用。柳叶蜡梅叶具有浓郁的香味，其精油成分不仅有镇痛、镇咳、祛痰作用，还能抑制食欲，明显减缓小鼠体重增长，起到减肥作用。该药使用历史悠久、疗效确切、副作用较少，是值得研究开发的药茶多用品种。经国家有关科研单位测定，柳叶蜡梅含挥发油、槲皮素、碱、黄酮类等多种有效性成分，铁、钙、锌、镁、硒等微量元素及维生素B1、维生素B2、维生素C等含量丰富，并含18种氨基酸。

本发明以柳叶蜡梅枝干等器官为研究对象，进行提取、分离、纯化、结构鉴定得到7-羟基-6,8-二甲氧基-3-(6′-甲氧基-7′-香豆素酯)，属于香豆素的二聚体类化合物，该化合物具有明显的抗肿瘤活性。

(三)发明内容

本发明旨在提供一种香豆素二聚体7-羟基-6,8-二甲氧基-3-(6′-甲氧基-7′-香豆素酯)及其制备方法和应用。

本发明的技术方案为：

一种式(I)所示的香豆素二聚体：

一种式(I)所示的香豆素二聚体的制备方法，所述的制备方法按如下步骤进行：

(1)将柳叶蜡梅的枝干进行粉碎干燥后，用乙醇浸提提取，之后过滤除去不溶物，取滤液减压浓缩得到乙醇浸膏；

(2)将步骤(1)所得乙醇浸膏分散于水中，得到悬浮液，所得悬浮液先用石油醚萃取，之后石油醚萃余液(水相)再用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯萃取液，将所得乙酸乙酯萃取液进行减压浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；

(3)用200～300目柱层析硅胶对步骤(2)所得乙酸乙酯浸膏进行柱层析分离，以石油醚/乙酸乙酯体积比为7：1～1：7的混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，减压浓缩后合并得粗品；

(4)对步骤(3)所得粗品进行凝胶柱层析分离，以甲醇/氯仿体积比1：0.5～2的混合液为洗脱剂，收集含目标化合物的洗脱液，减压蒸除溶剂得到所述的香豆素二聚体。

本发明所述的制备方法，步骤(1)中，推荐用于浸提提取的乙醇为体积分数95％的乙醇；所述乙醇浸提提取的具体操作方法为：将粉碎干燥后的柳叶蜡梅枝干与乙醇以料液质量比1：0.8～1混合，常温(20～30℃)浸提5～10天，过滤得到乙醇浸提提取液，重复浸提2～4次，合并每次所得乙醇浸提提取液，50℃减压旋蒸回收乙醇，得到乙醇浸膏(粘稠状，无醇味)。

步骤(2)中，将所述乙醇浸膏分散于水中时，推荐所述乙醇浸膏与水的质量比为1：2～4；所述悬浮液用石油醚进行萃取时，推荐所述悬浮液用等体积的石油醚萃取3次，石油醚萃取之后的萃余液(即下层水相)继续用等体积的乙酸乙酯萃取3次。

步骤(3)中，用200～300目柱层析硅胶对乙酸乙酯浸膏进行柱层析分离时，所述梯度洗脱的具体操作方法为：以石油醚/乙酸乙酯体积比分别为7：1、5：1、3.5：1、2：1、1：1、1：2、1：3.5、1：5、1：7的混合液为洗脱剂，进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为4～10mL/min(优选6mL/min)，每种不同比例洗脱剂的洗脱时间为200min～500min，收集含目标化合物的洗脱液，减压浓缩后合并得粗品。