[发明专利]测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法

权利要求书

1.一种测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)内标溶液的制备：以丙酸苯乙酯为内标物，使用乙醇为溶剂，制备内标溶液；

(2)标准工作溶液的制备：以咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的标准品为目标物，使用乙醇为溶剂，经逐级稀释制备成标准储备溶液，然后分别加入一定量的内标溶液，制备成标准工作溶液；

(3)样品溶液的制备：称取一定量的食用香精样品于离心管中，加入一定量的水，再准确移入一定体积的内标溶液，用漩涡混合器分散均匀；接着再加入一定体积的乙醇，超声萃取，加入一定量的无水硫酸钠，摇匀后静置，之后于离心机内离心，取上层清液过有机相滤膜，得样品溶液；

(4)气相色谱-串联质谱仪分析：用气相色谱-串联质谱仪对标准工作溶液和样品溶液进行检测分析；

(5)标准工作曲线的绘制及样品结果的计算，

其中，步骤(4)GC-MS/MS分析的仪器分析条件为：采用规格为30m×0.25mm×0.25μm的HP-INNOWAX毛细管色谱柱；载气为氦气，恒流速度为1.0mL/min；进样方式：进样量为1μL，脉冲不分流进样，进样脉冲压力为25psi，时间为1min；进样口温度为250℃；传输线温度为260℃；升温程序为初始温度为100℃，以3℃/min的速率升高至240℃，保持5min；质谱分析条件为：电离方式为EI源，正离子模式；离子源温度：230℃；四极杆温度：均为150℃；碰撞气：氮气，流速1.5mL/min，载气氦气流速为2.25mL/min；多反应监测MRM模式，详细参数列于下表:

目标物的MRM参数情况

2.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(1)内标溶液的制备包括：

(1a)内标储备液：称取0.2g丙酸苯乙酯，精确至0.0001g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀；

(1b)内标溶液：准确移取0.1mL内标储备液，用乙醇定容至100mL容量瓶中，摇匀。

3.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(2)标准工作溶液的制备包括：

(2a)一级标准储备液：分别称取咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚各0.1g，精确至0.0001g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀；

(2b)二级标准储备液：准确移取1mL一级标准储备液，于100mL的容量瓶中，用乙醇稀释并定容至刻度；

(2c)标准工作溶液：分别准确移取二级标准储备液20μL、50μL、100μL、200μL、500μL和1000μL至10mL的容量瓶中，再分别准确加入100μL内标溶液，用乙醇稀释并定容至刻度，得系列标准工作溶液。

4.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(3)样品溶液的制备包括：称取0.5g样品，精确到0.0001g，置于50mL离心管中，加入1mL水，准确移入100μL内标溶液，用漩涡混合器分散均匀，再加入8mL乙醇，置于超声波发生器内超声萃取20min，加入0.5g无水硫酸钠，摇匀后静置5min，之后于离心机内在4000r/min转速下离心5min，取上层清液过0.45μm有机相滤膜，得到样品进样溶液。

5.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(5)标准曲线绘制及结果计算如下：以标准工作溶液中目标物与内标的浓度之比为横坐标，以色谱图中目标物与内标的峰面积之比为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线，将相同条件下测得的样品溶液中目标物与内标的色谱峰面积比，代入标准工作曲线，根据下列公式求得食用香精样品中目标物的含量：

$W=\frac{(\frac{A}{As}-b)\×Ms}{a\×M}$

式中：

W——食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量，单位为mg/kg；

A——咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的峰面积；

As——内标物丙酸苯乙酯的峰面积；

b——标准工作曲线的截距；

Ms——添加内标物丙酸苯乙酯的质量，单位为μg；

a——标准工作曲线的斜率；

M——食用香精样品的质量，单位为支。