[发明专利]一种3‑氨基哌啶手性纯度的分析方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法。

背景技术

(R)-3-氨基哌啶是Ⅱ型糖尿病新药利拉利汀、阿格列汀的重要中间体。利拉利汀是德国勃林格殷格翰制药公司2011年上市的口服降糖药。阿格列汀是由日本武田制药公司开发的DPP-Ⅳ抑制剂，于2013年1月获美国FDA批准上市。利拉利汀、阿格列汀分子结构中只有一个手性中心，由中间体(R)-3-氨基哌啶引入，因此(R)-3-氨基哌啶的光学纯度直接决定了利拉利汀、阿格列汀的光学纯度和药效。制备高标准、高光学纯度的(R)-3-氨基哌啶，对于合成新药利拉利汀、阿格列汀具有重要理论意义与实际意义。

Meek等(WO2011160037)采用Crownpak^TM CR+(150×4.6mm)手性柱，示差折光检测器直接对3-氨基哌啶进行检测，孙凤霞等(CN104007202A CN104034814A)采用苯甲酰氯为衍生化试剂对3-氨基哌啶分别进行单衍生化和双衍生化，使用CHIRAL-AGP(150×4.6mm)手性柱，在254nm下对衍生物进行分析， Watanabe等人（Tetsuya Assignee Sumitomo Chemical Co.,Ltd., Japan 2009）采用氯甲酸丙酯为衍生化试剂对3-氨基哌啶进行衍生，采用CHIRALCEL AS-RH (150×4.6mm)手性柱在254nm下对衍生物进行分析。示差折光检测器灵敏度低，进样量大，误差较大。而以紫外进行的检测，既衍生化又采用价格昂贵的手性柱。

相比示差折光检测器，紫外检测器具有更高的灵敏度和稳定性。但由于3-氨基哌啶及其手性异构体紫外吸收很弱，使用常规的紫外检测存在末端吸收干扰等问题，通常采用衍生化方法使之紫外吸收增强从而提高检测灵敏度。而通过与手性试剂进行衍生化，得到具有三个手性基团的衍生物，能够直接在反相柱上进行异构体的分析。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种3-氨基哌啶3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，可以快捷准确的实现定性、定量和对映体过量率分析。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一种3-氨基哌啶手性纯度的分析方法，具体包含如下步骤：

步骤一、衍生化

将3-氨基哌啶溶于有机溶剂中，在一定的温度条件下，以(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯为衍生化试剂，控制3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比，进行双衍生化反应，得到衍生化后的3-氨基哌啶，反应式见式I；

步骤二、分离检测

采用反相高效液相色谱-紫外检测器对衍生化后的3-氨基哌啶进行定性、定量和对映体过量率测定。

所述的有机溶剂选自庚烷、己烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿和四氯化碳中的一种或两种以上的组合。

所述的有机溶剂与3-氨基哌啶的体积比为0.5~300:1，优选的体积比范围为2~20:1。

所述的一定温度是指从15℃到回流温度。

本发明的回流温度具体数值与有机溶剂的选择有关，本领域技术人员可以根据溶剂的选择清楚的确定回流温度的范围。

所述的3-氨基哌啶和(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯的摩尔比为1:2~5，优选的摩尔比是1:2。

所述的紫外检测器的检测波长为210~300nm，优选220~260nm。

所述的反相高效液相色谱选自十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱、辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱或者苯基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，优选十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱。

所述的反相高效液相色谱的流动相由水和有机溶剂组成，有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇和乙腈中的一种或两种；有机溶剂占流动相的体积比例范围为40%～90%，优选的范围为60%~80%。

所述的流动相中还添加有表面活性剂，所述表面活性剂选自二乙胺、三乙胺、季铵盐、磺酸盐。

所述的流动相流速为0.5~3.0mL/min，优选的流速为1.0mL/min。

所述柱温为20~40℃，优选的柱温为30℃。

所述衍生化后的3-氨基哌啶在反相高效液相色镨的进样浓度为0.005~5mg/mL，优选的浓度为0.1~1mg/mL。